پاورپوینت درباره دستگاه عصبی و سلولهای عصبی

اختصاصی از یارا فایل پاورپوینت درباره دستگاه عصبی و سلولهای عصبی دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

فرمت فایل : power point  (لینک دانلود پایین صفحه) تعداد اسلاید  : 43 اسلاید

مشخصات سلول های عصبی :

o1- تحریک پذیری  Excitability

oحساسیت موجودات زنده به تغییرات محیط خارجی و درونی می باشد.

o2- هدایت    Conduction

oخاصیت رشته های عصبی برای انتقال پیام به مغز برای آگاه کردن آنها از تغییرات محیط

 

 

پتانسیل استراحت         Resting potential

 

 

oوقتی هیچ محرک خارجی برای غشاء عصبی وجود نداشته باشد. گفته می شود غشاء در حالت استراحت است. در این حالت چون غشاء پلاریزه می باشد پتانسیلی در آن به وجود
می آید که به آن پتانسیل استراحت می گویند.

oمیزان آن 70- تا 90- میلی ولت است.

o

گرادیان غلظتی حاصل از پمپ سدیم ـ پتاسیم

 

oپمپ سدیم ـ پتاسیم گرادیان های غلظتی بزرگی بین دو سوی غشاء در حالت استراحت برای سدیم و پتاسیم به وجود می آورند که عبارتند از :

oغلظت سدیم در خارج غشا 142 میلی اکی والان

o                                                               نسبت یون از داخل به خارج

oغلظت سدیم در داخل غشاء 14 میلی اکی والان

oغلظت پتاسیم در خارج غشا 4 میلی اکی والان

o                                                                 نسبت یون از داخل به خارج

oغلظت پتاسیم در داخل غشا 140 میلی اکی والان

دانلود تحقیق کامل درمورد مشکلات پیوند سلولهای بنیادی

اختصاصی از یارا فایل دانلود تحقیق کامل درمورد مشکلات پیوند سلولهای بنیادی دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

لینک پرداخت و دانلود *پایین مطلب*
فرمت فایل:Word (قابل ویرایش و آماده پرینت)
تعداد صفحه: 16

مشکلات پیوند سلولهای بنیادی

قبل از اینکه در مورد چگونگی تمایز سلولهای بنیادی صحبت کنم گفتن این نکته ضروری میباشد که ما برای استفاده از سلولهای بنیادی جنینی برای اهداف درمانی به دو صورت میتوانیم از سلولهای بنیادی استفاده کنیم یا این سلولها را متمایز کرده و به بدن بیمار انتقال میدهیم فرایندی که به ان transplant  گفته میشود یا اینکه سلولها را به همان صورت سلول بنیادی به بدن بیمار انتقال میدهیم. فرایند انتقال سلولهای بنیادی به بدن بیمار با مشکلاتی همراه میباشد.این مشکلات را من در 4 مطلب زیر برایتان توضیح خواهم داد

      Immunological problem(مسایل ایمونولوژیکی)

      Contamination problem(مسایل آلودگی)

      Tumorogenesis problem(به وجود آمدن تومور)

      Ethical problem( مسایل اخلاقی )

 Immunological rejection in exenografting

فعال شدن Tcells  نقش اصلی را در رد پیوندهای ایمونولوژیکی بازی میکند. سیستم ایمونولوژیکی بدن جسم خارجی را به وسیله دو مسیر مستقیم و غیر مستقیم تشخیص میدهد مسیر مستقیم شامل وجود MHC-1 روی سلولهای خودی میباشد سیستم ایمنی میتواند بین MHC-1 خودی و غیر خودی تشخیص قایل شود. سلولهاییکه دارای MHC-1 متفاوتی از سلول میزبان میباشند باعث برانگیخته شدن سیستم ایمنی میشوند مسیر غیر مستقیم شامل فاگوسیت و هضم شدن  جسم خارجی و حضور این مواد هضم شده در سطح

antigen-presenting cells  میباشد مسیر غیر مستقیم تشخیص جسم خارجی به وسیله MHC-2 presentation  و فعل شده CD4 positive Tcell  نقش اصلی را در رد پیوند ایفا میکند.

Reduction of graft rejection(راههای کاهش رد پیوند)

1. سرکوب سیستم ایمنی به وسیله cyclosporin A که به پرونیین داخل سلولی cyclophilin متصل شده و این ترکیب باعث میشود که از فعالیت phosphatse پروتیین calcineurin جلوگیری شود و این باعث میشود تا از فسفریله شدن وابسته به کلسینورین  NFAT(nuclear factor of activated T cell جلوگیری شود
2. cotransplant سلولهای بنیادی مغز استخوان (بعدا مفصلا توضیح خواهم داد)از نوع استرومال همراه با سلول بنیادی جنینی  قابل ذکر میباشد که سلولهای بنیادی stromal  مغز استخوان که از نوع سلولهای بنیادی بالغین میباشند. دارای این خاصیت هستند که سیستم ایمنی را سرکوب کنند بعدا در مورد سلولهای بنیادی بالغین و این نوع از سلول بنیادی که سلولهای بنیادی مورد علاقه خودم نیز میباشد بیشتر و مفصل تر صحبت خواهم کرد.

در روند تکامل، تولید مثل جنسی موجودات عالی به عنوان راهی برای حفظ تنوع ژنتیکی جمعیتهای انتخاب شده است که بقای آن موجود در مواجهه با شرایط مختلف را امکانپذیر می سازد. در این نوع تولید مثل هر یک از این نطفه ها حامل نیمی از ژنهای والدین نر و ماده می باشد که به فرزندان منتقل می شود. تا قبل از کشف روش کلونینگ تصور بر این بود که سلولهای سوماتیک پس از تمایز یافتن قادر به برگشت به حالت اولیه ( تمایز نیافته) نمی باشند. به عبارت دیگر تصور قبلی بر این پایه بود که سلولهای سوماتیک با وجودی که تنمامی ژنها را در هسته همراه دارند، با این وجود قادر به تولید موجودی کامل نیستند. کلون کردن به معنی تکثیر غیر جنسی است نمونه عملی آن، تکثیر گیاهان است و یا در حشراتی مانند زنبور عسل و خزندگان و ماهیها و آبزیانی همانند آرتمیا پدیده ای به نام بکرزائی (Pathenogenis) وجود دارد که می توان آن را پدیده ای مشابه کلونینگ دانست. کشت بافت گیاهی فرآیندی است که در آن قطعات کوچکی از بافت زنده گیاهی جدا شده و به مدت نامحدودی در یک محیط مغذی سترون رشد داده می شود.کلونینگ از طریق مهندسی ژنتیک در گیاهان، حیوانات و یا حتی باکتریها، برای تولید انبوه با کیفیت خاص صورت می گیرد. از طریق این تکنولوژی می توان نسلهای در حال انقراض را نجات داد. از مزایای شبیه سازی در پرورش دامهای اهلی می توان به استفاده از تعداد محدودی از حیوانات پر تولید با هزینه نگهداری کمتر و افزایش سریع پیشرفت ژنتیکی گله اشاره کرد. با توجه به اینکه فنوتیپ افراد عمدتا تحت تاثیر مشترک وراثت و محیط می باشد هیچگاه حتی در دو قلوهای یکسان، دو فرد کاملا شبیه به هم نخواهد بود. نتیجتا در شبیه سازی ژنوتیپ افراد کاملا مشابه می باشد اما دو فرد مذکور فنوتیپ یکسانی نخواهد داشت.

روشهای کلونینگ:
شبیه سازی با روشهای گوناگونی و با اهداف متفاوت انجام می پذیرد که بطور کلی سه روش کلی در این مورد وجود دارد:
Embryonic Cloning الف- کلونینگ رویانی
این روش همان روشی است که در طبیعت در تولد دوقلوها یا چند قلوها رخ می دهد. در این روش در شروع مراحل تقسیم جنینی بعد از لقاح، یعنی زمانی که هنوز سلولهای جنینی تمایز نیافته اند یک سلول را جدا و با تحریکات، این سلول را به ادامه تقسیم تا حد به وجود آمدن یک جنین مستقل وادار می کنند.
Reproduction Cloning ب- کلونینگ تولید مثلی
هدف از این روش، تولید موجودات زایا با استفاده از سلولهای سوماتیک می باشد. در این روش در مرحله خاصی از تقسیم سلولی، هسته سلولهای سوماتیک را که در هسته شان حاوی تمامی ژنهای موجود می باشند جدا کرده و پس از تیمار الکتریکی یا شییمیایی این هسته را در داخل یک تخم لقاح نیافته که هسته آن قبلا خارج شده قرار می دهند سپس مجموعه حاصل را در رحم مادری که بطور مصنوعی شرایط آبستنی در آن القاء شده لانه گزینی می نمایند که در نهایت موجود جدید کاملا شبیه فردی خواهد شد که سلول سوماتیک از آن اخذ شده است.
Therapeutic Clonigج- کلونینگ درمانی
در این روش ابتدا با استفاده از سلولهای سوماتیک یک فرد، شبیه سازی انجام می گردد و در مرحله اولیه جنینی از رویانی که حاوی چند سلول است تعدادی سلول جدا و در محیط کشت اختصاصی، سلول، بافت یا اندام مورد نظر تکثیر می شود. هدف از این روش تولید بافت یا عضوی است که فرد از دست داده است مثل پوست تحلیل رفته در نتیجه سوختگی، کلیه، کبد، مغز استخوان، قلب، سلولهای عصبی یا عضلانی. واضح است پیوند اعضا تولید شده به خود شخص، به دلیل قرابت ژنتیکی به مراتب موفقیت آمیزتر است و بعد از پیوند نیازی به مصرف داروهای مضرر به منظور جلوگیری از دفع پیوند به مدت طولانی وجود ندارد.

تاریخچه کلونینگ:

تکنیک کلونینگ ابتدا در دوزیستانی مثل قورباغه موفقیت آمیز بود. در سال 1996 خبر تولد اولین گوسفند همانند سازی شده مدتها تیتر بسیاری از نشریات و منابع خبری را به خود اختصاص داد. مبنای علمی این خبر در سال 1997 در یک مقاله چاپ شده در مجله نیچر تحت عنوان» تولید نتاج زنده حاصل از سلولهای جنسی و سلولهای بالغ پستانداران« به اثبات رسید. این گوسفند ماه از سلولهای پستانی منجمد یک گوسفند که سالها پیش مرده بود، بدست آمد. در بوجود آوردن دالی دانشمندان با جدا سازی 227 سلول از سلولهای پستان گوسفند بالغ و انتقال آن به 227 تخمک غیر بارو که هسته آنها خارج شده بود. توانستند سلولهای جنینی بوجود آوردند و آنها را به مدت 6 روز در آزمایشگاه کشت دادند. دانشمندان سپس 29 سلول جنینی را کشت داده و به 29 میش جانشین به عنوان مادر دوم وارد کرده و در رحم لانه گزینی نمودند در نهایت فقط یکی از آنها تولید گوسفند زنده به نام دالی کرد که بعد از 5 ماه و نیم از دالی متولد شد.

این فقط قسمتی از متن مقاله است . جهت دریافت کل متن مقاله ، لطفا آن را خریداری نمایید

بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش

اختصاصی از یارا فایل بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش دانلود با لینک مستقیم و پرسرعت .

چکیده پایان نامه

اطلاع از مسیرهای متابولیسم دارو نقش مهمی در درک سمیت دارو دارد. این اطلاعات می توانند در طراحی داروهای جدید و روشن کردن مکانیسم سرطان زایی ترکیبات شیمیایی به کار روند. از این رو یافتن روشی مناسب برای بررسی متابولیسم داروها گام مهمی در جهت رسیدن به دیگر اطلاعات  با ارزش در مورد داروها است. متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان، خرگوش و موش صحرایی بررسی شده است. طبق نتایج به دست آمده از این مطالعات نوسکاپین از دو مسیر o- دمتیلاسیون و شکسته شدن پیوند C_1-9متابولیزه می شود و مکونین به عنوان محصول عمده متابولیسم آن شناخته شده است. در این تحقیق متابولیسم نوسکاپین توسط یک روش ex vivo، سلولهای جدا شده کبدی، مورد بررسی قرار گرفت این روش از چند جنبه دارای اهمیت است: این روش حد واسط مناسبی بین روشهای قبلی مانند آنزیم های حل شده، فراکسیون ارگان جدا شده و مطالعه مستقیم روی حیوان کامل است. این سلولها خصوصیات لازم بافت دست نخورده مانند نفوذپذیری غشا را دارا هستند از این رو در بسیاری از مطالعات بیوشیمیایی به کار می روند.

در این تحقیق سلولهای کبد موش صحرایی طی یک فرآیند دقیق جدا شدند و زنده بودن آنها با آزمایش منع تریپان آبی %۱/۰ و مشاهده میکروسکوپی سلولها تأیید شد. شناسایی استاندارد داروی نوسکاپین و متابولیت اصلی آن، مکونین توسط روش HPLC صورت گرفت. اگر چه استانداردهای نوسکاپین و متابولیت اصلی آن در محلولهای Spike شده مشاهده شدند اما این روش قادر به شناسایی متابولیت ها در عصاره سلولی نبود. به نظر می رسد که افزایش حساسیت روش به مشاهده همزمان نوسکاپین و متابولیت ها کمک کند.

مقدمه:

متابولیسم یکی از مراحل مهم فارکوکینتیک داروها است. مطالعه در مورد متابولیسم داروها برای دستیابی به اطلاعاتی در مورد سمیت داروها و مکانیسم اثر آنها مفید است. روش های مختلفی برای بررسی متابولیسم وجود دارند که عبارتند از: خوراندن ترکیبات به حیوانات در حالت عادی یا با کانول در راههای صفراوی و مطالعه و جستجوی متابولیت های دارو در مایعات بیولوژیک مانند خون، ادرار، و … ، مطالعات آنزیمی بر روی برشهای بافتی، هموژنه ها و اجزای سلولی. مطالعه روی حیوان دارای مشکلاتی است بنابراین در این مطالعه از سوسپانسیون سلولهای جدا شده کبدی استفاده شده است. این روش علاوه بر بررسی متابولیسم در سایر مطالعات بیوشیمیایی از جمله مطالعه روی گلوکونئوژنز، گلیکولیز، سنتز پروتئین، لیپید، اسیدهای چرب و اوره، انتقالات غشاء و … نیز می تواند مورد استفاده قرار گیرد.

1-1- اوپیوییدها

۱-۱-۱- تاریخچه

کلمه اوپیویید برای همه مشتقات طبیعی و نیمه صناعی آلکالوییدی تریاک، داروهای مشابه صناعی و شبه اوپیوییدی که فعالیت آنها با آنتاگونیست اوپیوییدی، نالوکسان مهار می شود و همچنین چندین پپتید درون زاد که با چندین زیر گونه از گیرنده های اوپیویید تعامل می کنند، استفاده می شود.

این مواد سالهاست به عنوان ضددرد، نشاط آور و ضد اسهال کاربرد دارند. اوپیوییدها از تریاک استخراج می شوند. تریاک ترشحات خشک شده کپسول نارس گیاه خشخاش با نام علمی Papaver somniferum است و آلکالوییدهای زیادی دارد که مسئول اثرات فارماکولوژیک آن هستند. مورفین یکی از آنها است. شواهدی در دست است که از حدود ۶۰۰۰ سال قبل در مصر باستان، یونان و روم قدیم از گیاه خشخاش استفاده شده است. این گیاه دارای دو محصول اصلی است، دانه های خشخاش که بدون مورفین و دارای روغن قابل مصرف اندو دیگری تریاک که دارای شهرت خطرناک و رعب آور است. دانه های خشخاش بعد از رسیدن دارای هیچ ماده خطرناکی نیستند و قابل خوردن یا مصارف دیگر هستند (۱و۲).

در سال ۱۸۰۳ داروشناس آلمانی سرتورنور (Serturner) با جدا ساختن یک ماده قلیایی فعال خالص از تریاک، فارماکولوژی مدرن این داروها را پایه گذاری نمود. در تاریخ داروسازی، این اولین باری بود که از یک ماده طبیعی مشتقی با قدرت اثر استاندارد جدا می شد. سرتورنور با الهام از نام الهه رویاهای یونانی Morpheus نام مورفین را به این ترکیب جدید داد. استخراج صنعتی مورفین برای اولین بار در سال ۱۹۲۸ با دستگاههایی که توسط فردی به نام جانوس کابای Janos kabay تکامل یافته بود، عمل شد (۲و۳).

۱-۱-۲- آلکالوییدهای تریاک

بیش از ۴۰ آلکالویید مختلف از تریاک و عصاره آن به دست آمده است. بعضی از این آلکالوییدها ترکیبات تغییر یافته آلکالوییدهای اصلی که به طور طبیعی در گیاه موجودند، می باشد. آلکالوییدهای اصلی تریاک دو دسته اند:

الف) فنانترن ها: مورفین (%۲۱-%۴)، کدئین (%۵/۲-%۸/۰)، تبائین (%۲-%۵/۰)

ب) بنزیل ایزوکینولین ها: نوسکاپین (%۸-%۴)، پاپاورین (%۵/۲-%۵/۰)، نارسئین (%۲-%۱/۰) (شکل ۱-۱).

تریاک همچنین محتوی ۳ تا ۵ درصد اسیدمکونیک است که به حال آزاد یا ترکیب با مورفین، کدئین یا سایر آلکالوییدها دیده می شود. اسیدمکونیک به صورت منشور کریستالیزه شده در آب و الکل محلول است و با کلرور فریک تولید رنگ قرمز می کند. این رنگ در اثر افزودن اسید کلریدریک تغییر نمی کند. از آنجا که اسیدمکونیک فقط در تریاک وجود دارد، می توان از این آزمایش جهت تجسس تریاک استفاده نمود (۲).

۱-۱-۴- آثار اوپیوییدها بر اعضای مختلف

۱)  بی دردی: اوپیوییدها قوی ترین داروهای موجود برای تسکین درد هستند.
آلگونیست های قوی (یعنی آنهایی که بالاترین میزان تأثیر ضد دردی را دارند) عبارتند از مورفین، متادون، مپردین و فنتانیل. کدئین، هیدروکدون و اکسی کدون آگونیست های ضعیف تا متوسط هستند. پروپوکسی فن یک داروی آگونیست بسیار ضعیف است.

۲)  آرام بخشی و سرخوشی: این اثرات مرکزی ممکن است در دوزهای پایین که برای حداکثر بی دردی لازمند، رخ دهند. بعضی از بیماران دچار خماری (dysphoria)
می شوند. در دوزهای بالاتر، این داروها ممکن است سبب تیرگی شعور شده و اثرات تخدیری (narcosis) داشته باشند.

۳)  تضعیف تنفسی: اعمال اوپیوییدها در مدولا سبب مهار مرکز تنفسی می شود که با کاهش پاسخ دهی به تغییرات دی اکسیدکربن همراه است. افزایش PCO₂ ممکن است سبب اتساع عروق مغزی، افزایش جریان خون مغز و افزایش فشار داخل جمجمه شود.

۴)  اعمال ضدسرفه ای: سرکوب رفلکس سرفه با مکانیسم های ناشناخته، اساس استفاده بالینی اوپیوییدها به عنوان ضدسرفه است.

۵)  تهوع و استفراغ: تهوع و استفراغ بر اثر فعال شدن مرکز شیمیایی استفراغ (CTZ) ایجاد می شود و با حرکت افزایش می یابد.

۶)  اثرات معده ای روده ای: این داروها از طریق کاهش پریستالتیزم روده ای موجب یبوست می شوند که به خاطر تأثیر روی گیرنده های اوپیویید در سیستم عصبی روده است. این عمل قوی اساس استفاده از این داروها به عنوان عوامل ضد اسهال است.

۷)  عضلات صاف: اوپیوییدها موجب انقباض عضله صاف مجاری صفراوی می شوند (که می تواند تولید کولیک صفراوی کند)، تونوس اسفنگستر میزراه و مثانه را افزایش دهند، و کاهش در تونوس رحم ایجاد می کنند که ممکن است سبب طولانی شدن زایمان شود.

۸)  تنگی مردمک (میوزیس): انقباض مردمک اثر مشخصه همه اوپیوییدهاست به جز مپریدین که تأثیر مهار کننده موسکارینی دارد.

۱-۱-۵- مصارف بالینی اوپیوییدها

۱)  بی دردی: این داروها برای درمان درد نسبتا” متوسط تا شدید به کار می روند. در شرایط حاد، آگونیست های قوی معمولا” به صورت تزریقی تجویز می شوند. بی دردی طولانی مدت که عوارض جانبی آن قدری کمتر است، می تواند با تزریق اپی دورال بعضی از داروهای آگونیستی قوی (مثل مورفین) حاصل شود. فنتانیل از راه پوستی برای تأثیر ضددرد استفاده شده است. برای درد با شدت متوسط و در شرایط مزمن آگونیست های متوسط از راه خوراکی تجویز می شوند.

  
فهرست مطالب
عنوان                                         
 
چکیده پایان نامه
بخش اول: مقدمه
مقدمه     
1-1- اوپیوییدها     
1-1-1- تاریخچه     
1-1-2- آلکالوییدهای تریاک     
1-1-3- پپتیدهای اوپیویید درون زاد     
1-1-4- آثار اوپیوییدها بر اعضای مختلف     
1-1-5- مصارف بالینی اوپیوییدها     
1-2- متابولیسم     
1-2-1- تاریخچه     
1-2-2- کلیات متابولیسم     
1-2-3- مکان های متابولیسم داروها     
1-2-4- عوامل تعیین کننده سرعت تغییر شکل زیستی     
1-2-5- تکنیک های تجربی بررسی متابولیسم     
1-2-6- کاربرد و اهمیت بررسی متابولیسم     
1-3- جداسازی سلولهای کبد     
1-4- روش های مطالعه شده برای شناسایی و اندازه گیری نوسکاپین و متابولیت هایش     
1-5- کلیاتی درباره کروماتوگرافی و HPLC
1-5-1- تاریخچه     
1-5-2- اساس کروماتوگرافی     
1-5-3- فازهای متحرک و ساکن در کروماتوگرافی مایع     
1-5-4- کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا     
1-5-5- اساس دستگاه HPLC
1-6- نوسکاپین     
1-6-1- برخی اثرات نوسکاپین     
1-6-2- فارماکوکینتیک نوسکاپین     
1-6-3- مروری بر روند متابولیسم نوسکاپین     
بخش دوم: روشها و مواد
2-1- اهداف مطالعه     
2-2- دستگاه ها و وسایل      
2-3- مواد     
2-4- تهیه بافرهای پرفیوژن     
2-4-1- محلول Stock بافر هنکس با غلظت 10 برابر     
2-4-2- محلول Stock بافر کربس- هنزلیت با غلظت 2 برابر     
2-4-3- بافر هنکس یک     
2-4-4- بافر هنکس دو     
2-4-5- بافر کربس آلبومین     
2-4-6- بافر کربس- هپس     
2-5- تهیه محلول کلاژن و کوت کردن پلیت 6خانه     
2-6- محیط کشت     
2-6-1- مراحل تهیه محیط کشت: (1:1) DMEM, F12
2-7- سرم جنین گاو FBS
2-8- کیت استریل پرفیوژن     
2-9- تهیه هپاتوسیت های تازه     
2-9-1- نگهداری سلولهای به دست آمده از کبد موش     
2-9-2- بررسی حیات سلولی و نحوه اثر دادن دارو روی سلولهای جدا شده از کبد موش     
2-9-3- تهیه نمونه برای انجام آنالیز     
2-10- روش سنتز مکونین (6 و 7- دی متوکسی فتالید)     
2-11- دلایل انتخاب HPLC 
2-11-1- مشخصات دستگاه HPLC
2-11-2- انواع روش های HPLC آزمایش شده     
2-11-3- روش تهیه بافر 10X استات با  pH=4
2-11-4- روش تهیه بافر فسفات سدیم Mm 25 با 5/4 pH=
2-12- استخراج متابولیت از ادرار انسان     
بخش سوم: نتایج
3-1- جداسازی سلولهای کبد     
3-2- سنتز مکونین     
3-3- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)     
بخش چهارم: بحث و نتیجه گیری
4-1- جداسازی سلول های کبد موش     
4-2- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی  HPCL
 4-3- متابولیسم نوسکاپین     
4-4- متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان     
خلاصه انگلیسی     
منابع     
اختصارات 

پایان نامه بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش

اختصاصی از یارا فایل پایان نامه بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش دانلود با لینک مستقیم و پرسرعت .

چکیده :

در این تحقیق سلولهای کبد موش صحرایی طی یک فرآیند دقیق جدا شدند و زنده بودن آنها با آزمایش منع تریپان آبی %1/0 و مشاهده میکروسکوپی سلولها تأیید شد. شناسایی استاندارد داروی نوسکاپین و متابولیت اصلی آن، مکونین توسط روش HPLC صورت گرفت. اگر چه استانداردهای نوسکاپین و متابولیت اصلی آن در محلولهای Spike شده مشاهده شدند اما این روش قادر به شناسایی متابولیت ها در عصاره سلولی نبود. به نظر می رسد که افزایش حساسیت روش به مشاهده همزمان نوسکاپین و متابولیت ها کمک کند.

فهرست مطالب:

بخش اول: مقدمه
مقدمه
۱-۱- اوپیوییدها
۱-۱-۱- تاریخچه
۱-۱-۲- آلکالوییدهای تریاک
۱-۱-۳- پپتیدهای اوپیویید درون زاد
۱-۱-۴- آثار اوپیوییدها بر اعضای مختلف
۱-۱-۵- مصارف بالینی اوپیوییدها
۱-۲- متابولیسم
۱-۲-۱- تاریخچه
۱-۲-۲- کلیات متابولیسم
۱-۲-۳- مکان های متابولیسم داروها
۱-۲-۴- عوامل تعیین کننده سرعت تغییر شکل زیستی
۱-۲-۵- تکنیک های تجربی بررسی متابولیسم
۱-۲-۶- کاربرد و اهمیت بررسی متابولیسم
۱-۳- جداسازی سلولهای کبد
۱-۴- روش های مطالعه شده برای شناسایی و اندازه گیری نوسکاپین و متابولیت هایش
۱-۵- کلیاتی درباره کروماتوگرافی و HPLC
1-5-1- تاریخچه
۱-۵-۲- اساس کروماتوگرافی
۱-۵-۳- فازهای متحرک و ساکن در کروماتوگرافی مایع
۱-۵-۴- کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا
۱-۵-۵- اساس دستگاه HPLC
1-6- نوسکاپین

۱-۶-۱- برخی اثرات نوسکاپین

۱-۶-۲- فارماکوکینتیک نوسکاپین
۱-۶-۳- مروری بر روند متابولیسم نوسکاپین
بخش دوم: روشها و مواد
۲-۱- اهداف مطالعه
۲-۲- دستگاه ها و وسایل
۲-۳- مواد
۲-۴- تهیه بافرهای پرفیوژن
۲-۴-۱- محلول Stock بافر هنکس با غلظت ۱۰ برابر
۲-۴-۲- محلول Stock بافر کربس- هنزلیت با غلظت ۲ برابر
۲-۴-۳- بافر هنکس یک
۲-۴-۴- بافر هنکس دو
۲-۴-۵- بافر کربس آلبومین
۲-۴-۶- بافر کربس- هپس
۲-۵- تهیه محلول کلاژن و کوت کردن پلیت ۶خانه
۲-۶- محیط کشت
۲-۶-۱- مراحل تهیه محیط کشت: (۱:۱) DMEM, F12
2-7- سرم جنین گاو (FBS)
2-8- کیت استریل پرفیوژن
۲-۹- تهیه هپاتوسیت های تازه
۲-۹-۱- نگهداری سلولهای به دست آمده از کبد موش
۲-۹-۲- بررسی حیات سلولی و نحوه اثر دادن دارو روی سلولهای جدا شده از کبد موش
۲-۹-۳- تهیه نمونه برای انجام آنالیز
۲-۱۰- روش سنتز مکونین (۶ و ۷- دی متوکسی فتالید)
۲-۱۱- دلایل انتخاب HPLC
2-11-1- مشخصات دستگاه HPLC

2-11-2- انواع روش های HPLC آزمایش شده
۲-۱۱-۳- روش تهیه بافر ۱۰X استات با ۴ pH=
2-11-4- روش تهیه بافر فسفات سدیم Mm 25 با ۵/۴ pH=
2-12- استخراج متابولیت از ادرار انسان
بخش سوم: نتایج
۳-۱- جداسازی سلولهای کبد
۳-۲- سنتز مکونین
۳-۳- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)
بخش چهارم: بحث و نتیجه گیری
۴-۱- جداسازی سلول های کبد موش
۴-۲- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)
4-3- متابولیسم نوسکاپین
۴-۴- متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان
خلاصه انگلیسی
منابع

نوع فایل : Word

تعداد صفحات : 77 صفحه

پایان نامه بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش

اختصاصی از یارا فایل پایان نامه بررسی متابولیسم داروی نوسکاپین در سلولهای مجزای کبد موش دانلود با لینک مستقیم و پرسرعت .

فرمت فایل : WORD (قابل ویرایش)

تعداد صفحات:77

فهرست مطالب:
عنوان                                          صفحه

چکیده پایان نامه
بخش اول: مقدمه
مقدمه    
1-1- اوپیوییدها    
1-1-1- تاریخچه    
1-1-2- آلکالوییدهای تریاک    
1-1-3- پپتیدهای اوپیویید درون زاد    
1-1-4- آثار اوپیوییدها بر اعضای مختلف    
1-1-5- مصارف بالینی اوپیوییدها    
1-2- متابولیسم    
1-2-1- تاریخچه    
1-2-2- کلیات متابولیسم    
1-2-3- مکان های متابولیسم داروها    
1-2-4- عوامل تعیین کننده سرعت تغییر شکل زیستی    
1-2-5- تکنیک های تجربی بررسی متابولیسم    
1-2-6- کاربرد و اهمیت بررسی متابولیسم    
1-3- جداسازی سلولهای کبد    
1-4- روش های مطالعه شده برای شناسایی و اندازه گیری نوسکاپین و متابولیت هایش    
1-5- کلیاتی درباره کروماتوگرافی و HPLC    
1-5-1- تاریخچه    
1-5-2- اساس کروماتوگرافی    
1-5-3- فازهای متحرک و ساکن در کروماتوگرافی مایع    
1-5-4- کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا    
1-5-5- اساس دستگاه HPLC    
 
عنوان                                          صفحه

1-6- نوسکاپین    
1-6-1- برخی اثرات نوسکاپین    
1-6-2- فارماکوکینتیک نوسکاپین    
1-6-3- مروری بر روند متابولیسم نوسکاپین    
بخش دوم: روشها و مواد
2-1- اهداف مطالعه    
2-2- دستگاه ها و وسایل     
2-3- مواد    
2-4- تهیه بافرهای پرفیوژن    
2-4-1- محلول Stock بافر هنکس با غلظت 10 برابر    
2-4-2- محلول Stock بافر کربس- هنزلیت با غلظت 2 برابر    
2-4-3- بافر هنکس یک    
2-4-4- بافر هنکس دو    
2-4-5- بافر کربس آلبومین    
2-4-6- بافر کربس- هپس    
2-5- تهیه محلول کلاژن و کوت کردن پلیت 6خانه    
2-6- محیط کشت    
2-6-1- مراحل تهیه محیط کشت: (1:1) DMEM, F12    
2-7- سرم جنین گاو (FBS)    
2-8- کیت استریل پرفیوژن    
2-9- تهیه هپاتوسیت های تازه    
2-9-1- نگهداری سلولهای به دست آمده از کبد موش    
2-9-2- بررسی حیات سلولی و نحوه اثر دادن دارو روی سلولهای جدا شده از کبد موش    
2-9-3- تهیه نمونه برای انجام آنالیز    
2-10- روش سنتز مکونین (6 و 7- دی متوکسی فتالید)    
2-11- دلایل انتخاب HPLC    
عنوان                                          صفحه

2-11-1- مشخصات دستگاه HPLC    
2-11-2- انواع روش های HPLC آزمایش شده    
2-11-3- روش تهیه بافر 10X استات با 4 pH=    
2-11-4- روش تهیه بافر فسفات سدیم Mm 25 با 5/4 pH=    
2-12- استخراج متابولیت از ادرار انسان    
بخش سوم: نتایج
3-1- جداسازی سلولهای کبد    
3-2- سنتز مکونین    
3-3- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)    
بخش چهارم: بحث و نتیجه گیری
4-1- جداسازی سلول های کبد موش    
4-2- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)    
4-3- متابولیسم نوسکاپین    
4-4- متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان    
خلاصه انگلیسی    
منابع    
اختصارات    
 
چکیده پایان نامه
اطلاع از مسیرهای متابولیسم دارو نقش مهمی در درک سمیت دارو دارد. این اطلاعات می توانند در طراحی داروهای جدید و روشن کردن مکانیسم سرطان زایی ترکیبات شیمیایی به کار روند. از
این رو یافتن روشی مناسب برای بررسی متابولیسم داروها گام مهمی در جهت رسیدن به دیگر اطلاعات  با ارزش در مورد داروها است. متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان، خرگوش و موش صحرایی بررسی شده است. طبق نتایج به دست آمده از این مطالعات نوسکاپین از دو مسیر o- دمتیلاسیون و شکسته شدن پیوند C1-9 متابولیزه می شود و مکونین به عنوان محصول عمده متابولیسم آن شناخته شده است. در این تحقیق متابولیسم نوسکاپین توسط یک روش ex vivo، سلولهای جدا شده کبدی، مورد بررسی قرار گرفت این روش از چند جنبه دارای اهمیت است: این روش حد واسط مناسبی بین روشهای قبلی مانند آنزیم های حل شده، فراکسیون ارگان جدا شده و مطالعه مستقیم روی حیوان کامل است. این سلولها خصوصیات لازم بافت دست نخورده مانند نفوذپذیری غشا را دارا هستند از این رو در بسیاری از مطالعات بیوشیمیایی به کار می روند.
در این تحقیق سلولهای کبد موش صحرایی طی یک فرآیند دقیق جدا شدند و زنده بودن آنها با آزمایش منع تریپان آبی %1/0 و مشاهده میکروسکوپی سلولها تأیید شد. شناسایی استاندارد داروی نوسکاپین و متابولیت اصلی آن، مکونین توسط روش HPLC صورت گرفت. اگر چه استانداردهای نوسکاپین و متابولیت اصلی آن در محلولهای Spike شده مشاهده شدند اما این روش قادر به شناسایی متابولیت ها در عصاره سلولی نبود. به نظر می رسد که افزایش حساسیت روش به مشاهده همزمان نوسکاپین و متابولیت ها کمک کند.