مدلهای کیفیت در جهان بیش از پنج دهه است که با هدف ارزیابی سیستم های مدیریتی در ابعاد گوناگون سازمان ها تاسیس گردیده اند و هم اینک بالغ بر 70 کشور پیشرفته و در حال توسعه ، دارای مدل ملی کیفیت هستند.در ایران در آذر ماه سال 1386 مدل ملی کیفیت غذا، دارو و بهداشت (IMQA) با هدف ارتقاء سلامت جامعه و ترویج فرهنگ و مدیریت کیفیت در تولید محصولات غذایی، دارویی، آرایشی و بهداشتی ایجاد شد و حدود 5 سال است که این مدل مورد بهره برداری قرار گرفته است .این مطالعه پس از بررسی ومقایسه توانایی ها و ضعف های مدل کیفیت اروپایی و مدل ملی ارزیابی کیفیت ایران از دو منظر تعالی سازمانی و اندازه گیری عملکرد پرداخته است. در این مطالعه برای مقایسهی دو مدل از چارچوب کانجی برای مقایسهی مدل های تعالی سازمان و چارچوب اوتلی جهت بررسی سیستم های کنترل مدیریت استفاده شده است. نتایج آنالیز این تحقیق نشان می دهد علی رغم اینکه این دو روش به نظر متفاوت می آیند از مفاهیم مشترکی برخوردارند. در نهایت می توان گفت پیاده سازی همزمان این دو روش در سازمانها میتواند مفید واقع گردد.
جهت دانلود از لینک ا
بخشی از متن اصلی :
فهرست مطالب :
عنوان صفحه
چکیده 1
مقدمه 3
فصل اول
1-1 - تالاسمی 8
1-2-اتیولوژی و سبب شناسی تالاسمی 8
1-2-1 - خون شناسی 9
1-2-2- خون سازی و گلبولهای قرمز 10
1-3- تالاسمی و انواع آن 10
1-3-1 آلفا تالاسمی 10
1-3-2- بتا تالاسمی 11
1-3-2-1 بتا تالاسمی مینور(سالم ناقل) 11
1-3-2-2 – بتا تالاسمی ماژور( بیماری تالاسمی) 12
1-3-2-3-بتا تالاسمی بینابینی 13
1-4- تشخیص تالاسمی 13
1-5- درمان تالاسمی 13
1-6- فیزیولوژی عنصر آهن و اهمیت آن در بدن انسان 14
1-6-1- مسمومیت حاد آهنی 15
1-7- دسفرال 16
1-7-1- نحوه استفاده از داروی دسفرال 17
1-7-2-کاربردهای داروی دسفرال در پزشکی 18
1-7-3- عوارض ناشی از داروی دسفرال 19
1-7-4- اقدامات احتیاطی در مورد داروی دسفرال 19
1-7-5- ملاک توقف درمان بوسیله دسفرال 20
فصل دوم
2-1- سیدرو فورها 22
2-1-1- هیدروکسامات ها 24
2-1-2-فنولات ها یا کاتکولات ها 25
2-2- دسفری اکسامین ها 26
2- 2-1 – ساختمان دسفری اکسامین 28
2-2-2- دسفراکسامین بصورت آنتی اکسیدان 28
2-2-3 – خصوصیات فیزیکو و شیمیایی دسفراکسامین 29
2-2-4- مکانیسم دسفراکسامین در جلوگیری از بیماریهای با بار اضافی آهن 29
2-2-5- تشکیل رادیکال DFO nitroxide 30
2-3- دسفری اکسامین B 31
2-3-1- بیوسنتر دسفری اکسامین B 33
2-3-2- ژنهای کد کننده دسفری اکسامین B 33
2-4- تولید کننده¬های دسفری اکسامین 34
2-5- اهمیت آهن بر روی میکروارگانیسمها 35
2-6- مکانیسم عمل سیدروفورها در ارتباط با انتقال آهن به درون سلول میکروارگانیسمها 36
2-7- تولید، استخراج و تخلیص دسفری اکسامین B 37
فصل سوم
3-1- اکتینومیست ها 40
3-2- استرپتومایسس ها 43
3-2-1- پاتولوژی 43
3-2-2 – مرفولوژی و ساختمان 43
3-2-3- مشخصات کلنی 454
3-2-4- اسپورزایی 47
3-2-5- ترکیبات پوشش سلولی 49
3-2-6- تغذیه و فاکتورهای موثر بر رشد و خصوصیات فیزیکوشیمیایی 49
3-2-6-1- تغذیه 49
3-2-6-2- اکسیژن 50
3-2-6-3 - رطوبت 50
3-2-6-4- دما 51
3-2-6-5- pH 51
3-2-6-6- اکولوژی 52
3-2-6-7- بیولوژی توسعه یافته استرپتومایسس 53
3-2-7- انواع فرآورده های میکروبی 56
3-2-7-1- متابولیت های اولیه 56
3-2-7-2- متابولیت های ثانویه 56
3-2-7-2-1- آنتی بیوتیک ها 58
3-2-7-2-1-1- فیزیولوژی و تنظیم تولید آنتی بیوتیک 58
3-2-7-3- آنزیمها 63
3-2-7-3-1- پروتئازها 63
3-2-7-3-1-1- پروتئازهای اسیدی 67
3-2-7-3-1-1-1- رنین 67
3-2-7-3-1-2- پروتئازهای خنثی 67
3-2-7-3-1-3- پروتئاز های قلیایی 67
3-2-7-3-1-3-1- فرآیند تخمیر پروتئازهای قلیایی 68
3-2-7-3-1-3-2- تعیین فعالیت پروتئاز قلیایی 69
3-2-7-3-1-4- بازدارنده های فعالیت آنزیم پروتئاز وشلاته کننده ها 69
3-2-7-3-1-5- تجزیه 71
3-2-7-3-1-6- پروتئاز ها و استرپتومایسسها 71
3-2-8- محیط کشت تخمیر صنعتی 71
3-2-8-1- نیازهای غذایی میکروارگانیسمها 71
3-2-8-1-1- کربن 74
3-2-8-1-1-1- منابع کربن و استرپتومایسس ها 77
3-2-8-1-2-نیتروژن 78
3-2-8-1-2-1- منابع نیتروژن و استرپتومایسس ها 80
3-2-8-1-3- هیدروژن و اکسیژن 80
3-2-8-1-4- مواد معدنی 80
3-2-8-2-تنظیم کننده های متابولیکی 81
3-2-8-3- ضد کف ها 82
3-2-9- بیوسنتز در استرپتومایسس ها 83
فصل چهارم
4-1- دستگاه های مورد استفاده 86
4-2- وسایل مورد استفاده 86
4-3 - محیط های کشت مایع برای رشد باکتری 88
4-4- محیط های کشت جامد برای رشد باکتری 89
4-5- محیط های جامد برای تولید اسپور 89
4-6- مواد لازم جهت رنگ آمیزی گرم 90
4-7- مواد لازم جهت استفاده از میکروسکوپ نوری 91
4-8- محیط مورد استفاده جهت شناسایی کیفی دسفری اکسامین: محیط Des4 91
4-9- محیط مورد استفاده جهت اندازه گیری تولید دسفری اکسامین محیط Soy bean 91
4-10- مواد لازم جهت نگهداری و ذخیره باکتری ها 92
4-11- معرف های دسفری اکسامین 92
4-12- مواد لازم جهت رسم منحنی استاندارد دسفری اکسامین B 92
4-13- مواد لازم جهت استخراج دسفری اکسامین 92
4-14- مواد لازم جهت تهیه محلول Lysing Buffer 93
4-14-1 – مواد لازم جهت تهیه محلول Tris Hcl 93
4-15- محلول کازئین %5/0 دربافر فسفات 93
4-15-1- بافر فسفات (PBS) 93
4-16- محلول لوری (Lowry) 93
فصل پنجم
5 – ١- تهیه و آماده سازی سویه استرپتومایسس پیلوسوس 98
5 ـ ٢ ـ بررسی خصوصیات مرفولوژیکی سویه استرپتومایسس پیلوسوس 98
5-٢-١- خصوصیات ماکروسکوپی 99
5- ٢-١-١- کشت استرپتومایسس پیلوسوس بر روی محیط جامد 99
5-٢-١-٢- کشت استرپتومایسس پیلوسوس در محیط مایع 99
5-٢-٢ خصوصیات میکروسکوپی 99
5-٢-٢-١- تهیه لام از محیط کشت جامد 99
5-٢-٢-٢- تهیه لام از محیط کشت مایع 100
5ـ ٢ـ٢ـ ٣ـ رنگ آمیزی گرم 100
5 ـ ٣ـ تهیه مایع تلقیح 100
5 ـ ٣ـ ١ـ تهیه محیط ذخیره 101
5 ـ ٣ـ ٢ـ تهیه سوسپانسیون اسپور 101
5ـ ٤ـ رسم منحنی رشد استرپتومایسس پیلوسوس 101
5ـ ٥ـ بررسی تغییرات pH در محیط کشت Soybean 102
5ـ ٦ـ تولید دسفری اکسامین توسط استرپتومایسس پیلوسوس 102
5ـ ٦ـ ١ـ تشخیص کیفی دسفری اکسامین 102
5ـ ٦ـ ٢ـ سنجش میزان تولید دسفری اکسامین در هر روز 103
5-6-3- رسم منحنی استاندارد دسفرال 103
5-٧ـ استخراج دسفری اکسامین بوسیله فنل-کلروفرم 104
5 ـ ٧ـ ١ـ مزتیله کردن دسفری اکسامین 105
5-8- تعیین وجود دسفری اکسامین B در ماده استخراج شده 105
5ـ ٩ـ بهینه سازی محیط کشت تولید دسفری اکسامین 107
5ـ ٩ـ ١ـ بررسی اثر اسید آمینه ترئونین بر تولید دسفری اکسامین 107
5 ـ ٩ـ ١ـ ١ـ بررسی اثر اسید آمینه ترئونین بر تولید دسفری اکسامین در یک محدوده غلظت 107
5ـ ٩ـ ٢ـ بررسی اثر اسیدآمینه ترئونین و اسید آمینه لوسین و ویتامین تیامینB1) ( برتولید دسفری اکسامین 108
5 ـ ٩ـ ٣ـ بررسی گلوکز و ملاس و سوکروز بر تولید دسفری اکسامین 108
5ـ ٩ـ ٤ـ بررسی اثر شلاته کننده های کاتیون بر تولید دسفری اکسامین 108
5 ـ ٩ـ ٥ـ استفاده از محیط کشت عصاره مخمر به جای استفاده از محیط کشت Soybean 109
5 ـ ٩ـ ٦ـ بررسی اثر مواد معدنی مختلف بر میزان تولید دسفری اکسامین 109
5 ـ٩ـ٦ـ١ـ بررسی تاثیر مواد معدنی در غلظت های مختلف بر میزان تولید دسفری اکسامین 111
5 ـ ١٠ - بررسی پروتئاز تولیدی از استرپتومایسس پیلوسوس در حضور شلاته کننده ها و مواد معدنی مختلف 112
5 ـ ١٠ـ ١ـ کشت باکتری و سنجش پروتئاز 112
5 ـ ١٠ـ 2ـ تخلیص کازئین 113
فصل ششم
6ـ ١ـ بررسی خصوصیات مرفولوژیکی ماکروسکوپی استرپتومایسس پیلوسوس 115
6ـ ١ـ ١¬ـ خصوصیات ماکروسکوپی سویه استاندارد بر روی محیط کشت جامد 115
6 ـ ١ـ٢ـ خصوصیات ماکروسکوپی سویه استاندارد در محیط کشت مایع 115
6 ـ ٢ـ بررسی خصوصیات مرفولوژیکی میکروسکوپی استرپتومایسس پیلوسوس 116
6 ـ٣ـ رسم منحنی رشد استرپتوماسیس پیلوسوس در محیط کشت MYB 116
6-4- رسم منحنی pH بر حسب زمان در محیط کشت Soybean حاوی سویه استرپتومایسس پیلوسس 118
6 ـ ٥ـ تشخیص کیفی و کمی دسفری اکسامین تولیدی 120
6-5-1- تشخیص کیفی و تولید و یا عدم تولید دسفری اکسامین 120
6ـ٥ـ2ـ رسم نمودار استاندارد دسفرال 120
6ـ٥ـ3ـ میزان دسفری اکسامین تولیدی در هر روز توسط سویه استرپتومایسس پیلوسوس در محیط Soy bean 121
6-6- نتایج مربوط به استخراج دسفری اکسامین تولید شده توسط سویه استرپتومایسس پیلوسوس 122
6-6-1- نتایج مربوط به تأیید وجود دسفری اکسامین B در ماده استخراج شده 122
6-7- بهینه سازی محیط کشت تولید دسفری اکسامین 124
6-7-1 بررسی اثر اسید آمینه ترئونین بر تولید دسفری اکسامین 124
6-7-1-1- بررسی اثر اسید آمینه ترئونین بر تولید دسفری اکسامین در یک محدوده غلظت 124
6ـ7ـ ٢ـ بررسی اثر اسید آمینه های ترئونین و لوسین و ویتامین تیامین (B1 ) 126
6 ـ 7ـ٣ـ بررسی گلوکز ، ملاس، سوکروز بر تولید دسفری اکسامین 126
6ـ 7ـ ٤ـ بررسی اثر شلاته کننده های کاتیون بر میزان تولید دسفری اکسامین 127
6ـ 7ـ ٥ـ استفاده از محیط کشت عصاره مخمر به جای استفاده از محیط کشت Soybean 128
6 ـ 7ـ ٦ـ بررسی اثر مواد معدنی مختلف بر میزان تولید دسفری اکسامین 128
6 – 7 – 6 – 1 – بررسی اثر مواد مختلف با غلظت متفاوت بر میزان تولید دسفری اکسامین 130
6ـ8ـ بررسی پروتئاز تولیدی از استرپتومایسس پیلوسوس در حضور شلاتهکننده و مواد معدنی مختلف 139
فصل هفتم
- بحث و نتیجه گیری 143
- پیشنهادات 147
- فهرست منابع 149
چکیده
دسفری اکسامینB، تنها سیدروفوری است که فرم مزتیله آن (نمک متان سولفونات دسفری اکسامین B) با نام تجاری دسفرال جهت درمان بیماران تالاسمی، به منظور شلاته کردن بار اضافی آهن، استفاده می گردد.
به همین منظور جهت تولید دسفری اکسامین B، از سویه استرپتومایسس پیلوسوس استفاده گردید و سویه مربوطه در محیط کشت Soy bean کشت داده شد و دسفری اکسامین آن بوسیله استفاده از محلول فنل- کلروفرم و اتر استخراج گردید. به منظور طراحی این سیستم بیولوژیکی و افزایش بهره برداری از محصول مذکور از منابع کربن و نیتروژن مختلف استفاده گردید و تاثیر هر یک بر میزان دسفری اکسامین تولیدی بررسی شد. چنانچه مشاهده گردید که اسید آمینه ترئونین، افزایش قابل ملاحظه ای بر دسفری اکسامین تولیدی از سویه مذکور دارد و مقدار %125/0 ترئونین، در محیط کشت Soy bean، بسیار مطلوب می باشد. از طرفی اثر ویتامین تیامین (B1)بررسی گردید و مشاهده شد که تاثیر مثبت بر دسفر اکسامین تولیدی دارد و در رده بعد از اسید آمینه ترئونین قرار می گیرد. همچنین اثر اسید آمینه لوسین نیز بر تولید دسفری اکسامین مثبت بوده و در رده بعد از ویتامین تیامین (B1) قرار می گیرد.
در ایـن تحقـیق از شلاته کننـده های کاتیونی EDTA، 8-hydroxyquinoline در محـیط کشت Soy bean استفاده شد و مشاهده گردید که شلاته کننده های مذکور اثر منفی بر تولید دسفری اکسامین دارند در نتیجه، کاتیونها، اثر مثبت بر افزایش میزان دسفری اکسامین تولیدی خواهند داشت به همین منظور مواد معدنی مختلف از جمله اثر
و همچنین اثرCaCl2.2H2O,MgSO4.7H2O به طور همزمان در محیط کشت Soy bean بررسی گردید.
در این تحقیق نتایج مطلوبی بدست آمد، بطوری که کلسیم (بصورت CaCl2.2H2O) اثر قابل ملاحظهای بر افزایش میزان دسفری اکسامین تولیدی از سویه مذکور دارد و مقدار 8/2، و 2، CaCl2.2H2O سبب افزایش قابل توجهی بر میزان محصول مذکور می گردد. و بدین ترتیب تاثیر مثبت کلسیم، بر تولید دسفری اکسامین مشخص گردید.
در این آزمایشات تاثیر مثبت روی، منیزیم و منگنز بر دسفری اکسامین تولیدی آشکار گردید بطوری که غلظت 2-10 × 4/0، ZnSO4.7H2O و 6/0، MgSO4.7H2O و 2، MnCl2 سبب افزایش تولید دسفری اکسامین شد.
از طرفی استفاده همزمان CaCl2.2H2O,MgSO4.7H2O در محیط کشت Soy bean اثر منفی بر تولید دسفری اکسامین را نشان داد.
همچنین بررسی ها در مورد آهن (بصورت FeSO4.7H2O) نشان داد که افزایش غلظت آهن، سبب کاهش میزان دسفری اکسامین تولیدی گردید.
و اینگونه با استفاده از منابع نیتروژن و مواد معدنی مختلف بهینه سازی محیط کشت انجام گرفت و تولید دسفری اکسامین از سویه استرپتومایسس پیلوسوس به میزان قابل ملاحظه ای افزایش یافت.
در این تحقیق، پروتئاز تولیدی از سویه استرپتومایسس پیلوسوس نیز بوسیله روش لوری (Lowry) اندازه گیری شد و اثر روی بصورت ZnSO4.7H2Oو آهن بصورت FeSO4.7H2O نیز بررسی گردید و مشاهده شد که افزایش غلظت روی، سبب افزایش پروتئاز تولیدی، از سویه مذکور گردید.
مقدمه
چه قدر زیبا و شاعرانه است که انسان به نوای دلنواز عاشقانهای که در دل موجودات زنده نواخته می شود گوش دهد. تمام پدیده های هستی که زائیده اراده و مشیت الهی هستند منظر شناخت خداوند قادرند و چه با شکوه است علمی که انسان طالب معرفت را به سرچشمه شناخت این پدیده ها راهنمایی کند.
چشم دل بازکن که جان بینی آنچه نادیدنی است آن بینی
امروزه عرصه ای از حیات بشری را نمی توان یافت که تأثیر مثبت از بیوتکنولوژی نداشته باشد. کلمه بیوتکنولوژی که از دو بخش بیو (به معنی زندگی و موجودات زنده) و تکنولوژی (به معنای هنر بشر در استفاده از علم) تشکیل شده است [10] بطور کلی بیوتکنولوژی به مفهوم استفاده از موجودات زنده، اندام ها و سلولهای آنها برای تولید یک فرآورده با خدمات با ارزش اقتصادی به منظور بهبودرفاه بشر می باشد. [10] بعبارت دیگر بیوتکنولوژی دانشی است که در رابطه با استفاده از موجودات و متابولیتهای آنها جهت تولید فرآورده های مختلف دارویی، غذایی، شیمیایی و غیره در مقیاس صنعتی بحث می کند. [14]
سرآغاز بیوتکنولوژی به ده هزار سال پیش برمی گردد. [10] روند تکاملی بیوتکنولوژی در طی هزاران سال شکل گرفته است، ولی بیوتکنولوژی مدرن در اواسط دهه 70 متولد شد. [14] از همان آغاز، بیوتکنولوژی در قالب مهندسی شیمی توسعه یافت، از این رو با توسعه ی فرآیندهای صنعتی، گستردگی بیشتری پیدا کرد. [14) بیوتکنولوژی از تکنیکهای مختلف ژنتیک، میکروبیولوژی کاربردی، شیمی، بیو شیمی، بیو لوژی، مهندسی فرآیند و غیره تشکیل میشود.[14]
این فایل به همراه چکیده، فهرست مطالب، متن اصلی و منابع تحقیق با فرمت docx( wordقابل ویرایش) در اختیار شما قرار
می گیرد.
تعداد صفحات:186
رائه شده استفاده نمائید این لینک امکان 10 بار دانلود در 5 روز آینده را دارد.
فرمت:word(قابل ویرایش)
تعداد صفحات:123
پایان نامه در رشته داروسازی
فهرست مطالب:
چکیده
مقدمه
فصل اول: کلیات
آناتومی پستان
بافت شناسی پستان
فیزیولوژی پستان
تاریخچه کشف هورمون پرولاکتین و شرح اعمال آن در شیردهی از دیدگاه بیولوژی سلولی
تاریخچه کشف پرولاکتین
مهار عمل پرولاکتین
محرکهای پرولاکتین
اعمال پرولاکتین از دیدگاه بیولوژی سلولی
ارزیابی پرولاکتین
و نقش پرولاکتین در لاکتوژنز
شیر مادر، محتویات و فواید آن
آغوز (کلستروم)
بررسی تفاوت آغوز و شیر موقتی
محتویات و فواید شیر مادر
تغذیه با شیر مادر
ناکافی بودن شیر مادر
موارد قابل توجه در طی شیردهی
جلوگیری از بارداری در زمان شیردهی
از شیرگیری
اثرات شیر مادر بر سیستمهای گوناگون بدن نوزاد
تأثیر شیر مادر بر استخوان سازی نوزاد
تأثیر شیر مادر بر رشد و تکامل سیستم عصبی نوزاد
تأثیر شیر مادر بر سیستم ایمنی نوزاد و حمایت ایمونولوژیک غیر قابل جایگزینی آن
تأثیر شیر مادر بر تعادل وزن، قد و رشد نوزاد
تأثیر شیر مادر بر سیستم تنفسی نوزاد
تأثیر شیر مادر بر سیستم قلب و عروق نوزاد در سالهای آتی زندگی
تأثیر شیر مادر بر سیستم گوارشی نوزاد
تأثیر شیر مادر بر سیستم شنوایی نوزاد
تأثیر شیر مادر بر کاهش میزان کم خونی نوزاد
تأثیر شیر مادر در پیشگیری از دیابت نوع
تأثیر تغذیه با شیر مادر بر مننژیت ناشی از هموفیلوس آنفلوآنزا
فواید شیردهی بر مادر شیرده
مقایسه محتوای شیر مادر با شیر گاو
محتوای شیر خشک و مضرات آن در مقایسه با شیر مادر
خطرات شیرخشک
موارد منع شیردهی
مادران شیرده شاغل
تأثیر الکل بر شیردهی
تأثیر سیگار بر شیردهی
بیماریهای پستان
ناهنجاریهای رشد پستان
ترشّحات غیر طبیعی پستان
غدد پستان
ترک و زخم نوک پستان، راههای پیشگیری و درمان
پدیده رینود
حساسیت موضعی پستان
تورم و پرخونی پستان
التهاب پستان
آبسه پستان
شیردهی و داروها
فاکتورهای مؤثر در ترشّح دارو و ورود آن به داخل شیر
مکانیزم انتقال داروها به داخل شیر
دسته داروها بر حسب مضر یا بی ضرر بودن در طی شیردهی
دسته داروهای بیضرر در طی شیردهی
دسته داروهایی که در طی شیردهی کمتر ایمن هستند
دسته داروهایی که در طی شیردهی خطرناک هستند
موارد قابل ذکر در مورد مصرف داروها در طی شیردهی
دم کردههای گیاهی بیضرر در طی شیردهی
اشعه X و اسکنها در طی شیردهی
فصل دوم: محرکهای شیردهی (گیاهی و شیمیایی)
گیاهان داروئی محرک شیردهی
قطره گیاهی شیرافزا
مواد مؤثره گیاهان موجود در قطره شیرافزا
فارماکولوژی
محرکهای شیمیایی: داروهای محرک شیردهی
متوکلوپرامید، دارویی با عارضه جانبی شیرافزایی
فصل سوم: بررسی آماری و نتایج
مطالب جمعآوری شده حاصل از نظریات پزشک (متخصص زنان، اطفال و ماما)
بررسی معیارهای پزشکان در مورد سنجش کافی بودن میزان شیر مادر
بررسی علل ناکافی بودن میزان شیر مادر
موارد ذکر شده به منظور افزایش شیردهی در درجه اول
بررسی آمار بدست آمده از پزشکان (بر حسب درصد)
علل تجویز فرآورده های خوراکی متوکلوپرامید
علل تجویز قطره شیر افزا
علل عدم تجویز فرآورده های خوراکی متوکلوپرامید توسط آن دسته از پزشکان که آنرا تجویز نمیکنند
علل عدم تجویز قطره شیرافزا توسط آن دسته از پزشکان که آنرا تجویز نمیکنند
سایر موارد دارویی تجویز شده به منظور افزایش شیر مادر
ترسیم نتایج حاصل به صورت جدول و نمودار ستونی
استفاده از روش آماری مجذور خی
آزمون فرض صفر و مقابل و ترسیم جدول فراوانیهای مورد انتظار بر اساس آن
فرمول مجذور خی و محاسبات
فصل چهارم
بحث و نتیجهگیری
خلاصه انگلیسی
فصل پنجم: مراجع
1-1آناتومی پستان
الف- طرز تشکیل پستان:
غدد پستانی، ساختار اختصاصی میباشند که به صورت واحدهای لولهای ترشّحی نسبتاً سادهای از غدد عرق هستند. در حدود سی و پنجمین روز از تکامل جنینی، با ضخیم شدن لایه مالپیگی روی سطح جانبی شکمی، سینهها شروع به تکامل یافتن میکنند. پستانها یا غدد شیری، اندامهای فرعی دستگاه تولید مثلی در زن میباشند. رشد پستانها از زمان تولد تا موقع بلوغ متوقف میماند. در زمان بلوغ تحت اثر هورمون استروژن و به میزان کمتر هورمونهای دیگر مانند هورمون رشد، انسولین، کورتیزون، هورمون تیروئید و هورمون پرولاکتین، پستان رشد مینماید. بعد که تخمکگذاری در زن شروع میشود، هورمون پروژسترون نیز که در این موقع ترشّح میشود به رشد بیشتر پستان کمک میکند. پس پستانها به طور قابل توجّهی بعد از دوران بلوغ رشد میکنند ولی حالت عملکردی کامل رشد آنها پس از دوره حاملگی روی میدهد. اما به طور کلی پستانها در مرد به صورت یک شکل توسعه نیافته میباشند.
پس از بلوغ در زن، هر پستان یک برجستگی مدور را روی دیوارههای قدامی و طرفی سینه، روی سطح عضله سینهای بزرگ تشکیل میدهد. پستانها از دومین تا ششمین دنده و از لبه خارجی استخوان جناغ تا خط زیر بغلی میانی توسعه مییابند. قسمت خارجی و بالایی هر پستان به طرف بالا به داخل زیر بغل توسعه یافته و به عنوان انتهای زیر بغلی پستان شناخته میشود. قسمت عمده پستان از بافت چربی تشکیل شده است. بنابراین اندازه پستان در افراد مختلف به طور قابل توجهی فرق میکند. در زیر مرکز پستان، نوک پستان به طرف جلو واقع میشود. نوک پستان معمولاً در فضای مابین چهارمین و پنجمین دنده قرار میگیرد. نوک پستان توسط یک حلقه پوستی صورتی رنگ احاطه شده است که هاله نوک پستان نامیده میشود. در هنگام اولین حاملگی، این هاله به رنگ قهوهای تیره درآمده و دیگر به رنگ صورتی اولیّه باز نمیگردد.
ب- ساختمان پستان:
پستان از بافت غده ای، بافت لیفی و بافت چربی تشکیل شده است. بافت غدهای از پانزده تا بیست لوب تشکیل شده است که هر یک از آنها به تعداد بسیار زیادی لوبول کوچک تقسیم میشوند. هر لوبول از تعداد زیادی آلوئول ترشّحی تشکیل شده است که به داخل شاخههایی از مجاری حامل شیر باز میشوند. هر لوب پستان دارای یک مجرای حامل شیر است. مجاری حامل شیر به طرف بالا تا هاله نوک پستان ادامه دارند و در آنجا تشکیل سینوسهای متّسعی را میدهند که این سینوسها مانند مخزنهایی برای ذخیره شیر هنگام ترشّح شیر عمل میکنند. بعد از این سینوسها، مجاری حامل شیر به طرف بالا راه یافته و توسط سوراخهای مجزایی به سطح نوک پستان باز میشوند. سطح خارجی پستان توسط نیام زیر پوستی که تیغههای لیفی زیادی به داخل غده شیری برای پشتیبانی لوبولها میفرستد، پوشیده شده است. رشتههای لیفی از نیام زیر پوستی به نوک پستان و هاله دور آن نیز میروند.
بافت چربی روی سطح غده شیری و نیز مابین لوبهای غده شیری قرار میگیرد.
ج- تغذیه خونی پستان:
پستانها، خون شریانی خود را توسط شاخههایی از شریانهای آگزیلاری، شریانهای بین دندهای و شریانهای پستانی داخلی دریافت میکنند.
وریدهایی که از پستان خارج میشوند، یک شبکه وریدی در زیر نوک پستان تشکیل میدهند. سپس این شبکه به داخل وریدهای پستانی داخلی و آگزیلاری تخلیه میشود.
د- تخلیه لنفاوی پستان:
عروق لنفاوی قسمت مرکزی پستان، پوست روی قسمت مرکزی پستان، نوک پستان و هاله نوک پستان به داخل یک شبکه عروقی روی سطح عضله سینهای بزرگ تخلیه میشوند. از این شبکه، عروق لنفاوی به گروه سینهای عقدههای لنفاوی آگزیلاری و به عقدههای لنفاوی پستانی داخلی میروند. تعداد کمی از این عروق ممکن است از خط وسط بدن به پستان طرف دیگر بروند و بعضی از عروق از قسمت داخلی تحتانی پستان به یک شبکه لنفاوی روی سطح عضله مستقیم شکمی میروند. قسمت عمده تخلیه نیمه خارجی پستان به داخل گروه سینهای عقدههای لنفاوی آگزیلاری و قسمت عمده تخلیه نیمه داخلی پستان، به داخل عقدههای لنفاوی پستانی داخلی صورت میگیرد. به هر حال مقدار مشخصی از لنف به داخل گروه خلفی عقدههای لنفاوی آگزیلاری تخلیه میشود.
هـ اعمال پستان در زن:
در ابتدای دوران بلوغ، افزایش ترشّح هورمونهای تخمدانی و هورمونهای گونادوتروپین، رشد پستانها را در زن تحریک میکند. به هر حال، رشد کامل در زمان حاملگی روی میدهد. در هنگام حاملگی، پستانها بزرگ شده و در اثر تحریک استروژن و پروژسترون رشد میکنند. پس از تولد بچه، سطح استروژن و پروژسترون خون پایین میافتد و هورمون ترشّح کننده شیرکه توسط لوب قدامی غده هیپوفیز ترشّح میشود، سلولهای آلوئولی را برای ترشّح شیر تحریک میکند. به هر حال، جاری شدن کامل شیر زودتر از 2 تا 3 روز پس از تولد نوزاد روی نمیدهد.
هورمون تیروئید و هورمونهای بخش قشری غده فوق کلیوی نیز برای تأمین شیر کافی، ضروری میباشند.
وقتی طفل مکیدن پستان مادر را آغاز میکند، لوب خلفی غده هیپوفیز برای تولید هورمون اکسی توسین تحریک میشود که این هورمون، شیر را از پستان بیرون میراند. بنابراین مکیدن پستان مادر یک تحریک مهم در ادامه جاری شدن شیر است.
1-2 بافت شناسی پستان
الف- غدد پستانی:
هر غدّه پستانی شامل 15 تا 25 لوب نامنظم از نوع لولهای – حبابی مرکب بوده و عملکرد آن ترشّح شیر برای تغذیه نوزاد است. هر لوب توسط بافت همبند متراکم و مقدار زیادی بافت چربی، از سایر لوبها جدا میشود و در حقیقت هر لوب به تنهایی غدّهای با مجرای ترشّحی مختص به خود است. این مجاری شیری 2 تا 5/4 سانتیمتر طول داشته و به طور مستقل در نوک پستان باز میشوند. نوک پستان دارای 15 تا 25 منفذ است که هر یک حدود 5/0 میلیمتر قطر دارد. ساختمان بافت شناسی غدد پستان بر حسب جنس، سن و وضعیت فیزیولوژیک متفاوت است.
ب- رشد پستان طی بلوغ:
پیش از بلوغ، غدد پستان از سینوسهای شیری و مجاری شیری منشعبی تشکیل میشوند که در انتهای هر یک، مجموعه سلولهای کوچکی قرار گرفته است. نموّ غدد پستان در زنان طی بلوغ، یکی از صفات ثانویه جنسی محسوب میگردد. طی این دوره غدد پستان از حیث اندازه بزرگ شده و نوک برجسته پستان را به وجود میآورند. در مردان، نوک پستان مسطح باقی میماند. بزرگ شدن پستان طی بلوغ در نتیجه تجمع بافت چربی و بافت همبند کلاژن دار، صورت میگیرد. منشعب شدن بیشتر مجاری شیری نیز نقش کوچکی در این میان دارد. تزاید مجاری شیری و تجمع چربی بر اثر افزایش میزان استروژنهای تخمدانی طی بلوغ روی میدهد. در خلال این مرحله، تشکیل ساختمانهای لولهای – حبابی کوچکی را میتوان در انتهای هر مجرا مشاهده نمود.
ج- ساختمان پستان در زنان بالغ:
طی بلوغ، مجاری شیری بر رشد خود افزوده و به طور وسیعی منشعب میشوند. در انتهای کوچکترین مجاری (مجاری بین لوبولی انتهایی)، ساختمان اختصاصی پستان زن بالغ، موسوم به لبول به وجود میآید. یک لبول از چندین مجرای داخل لوبولی تشکیل میشود که محتویات خود را به داخل مجرای بین لوبولی انتهایی میریزند. هر لوبول در بافت همبند داخل لوبولی پر سلول سستی قرار میگیرد. لوبولها توسط بافت همبند بین لوبولی متراکم تر و کم سلولی از یکدیگر مجزا میشوند. مجاری شیری نزدیک به منفذ نوک پستان متّسع میشوند تا سینوسهای شیری را به وجود آورند. سینوسهای شیری در منفذ خارجی خود از اپی تلیوم سنگفرشی مطبّق پوشیده شده اند. این اپی تلیوم به سرعت به اپی تلیوم مکعبی یا استوانهای مطبّق تبدیل میشود.
مطالعات با میکروسکوپ الکترونی، آشکار ساخته که سلولهای همجوار با مجرا، همان سلولهای اپی تلیال هستند. در حالی که سلولهایی که بر لایه بازال جای گرفته اند، سلولهای میواپی تلیال فشرده در کنار یکدیگرند. سلولهای اپی تلیال مجرا دارای تعداد اندکی میتوکندری، قناتهای معدودی از رتیکولوم آندوپلاسمی خشن، تعداد زیادی ریبوزوم آزاد و یک دستگاه گلژی کوچک میباشند. این سلولهای اپی تلیال توسط اتّصالات محکم و دسموزوم به یکدیگر متصل میشوند. سلولهای میواپی تلیال، دوکی شکلند و نحوه استقرار آنها به ترتیبی است که محور طولی این سلولها، به موازات طول مجرا قرار میگیرد. مجاری بین لوبولی انتهایی از اپی تلیوم مکعبی سادهای که بر لایه بازال قرار گرفته و لایه منقطعی از سلولهای میواپی تلیال تشکیل میشود.
در بافت همبند داخل لوبولی دربرگیرنده آلوئولها، تعدادی لنفوسیت و پلاسموسیت نیز به چشم میخورد. نزدیک به پایان حاملگی، این پلاسموسیتها به طور چشمگیری افزایش یافته و مسئول ترشّح ایمونوگلوبولینهایی IgA) ترشّحی) است که ایمنی غیر فعّال را به نوزاد میبخشند. طی چرخه قاعدگی تغییرات اندکی در ساختمان بافت شناسی این غدد مشاهده میشود. به این معنی که تزاید سلولها و مجاری در حدود زمان تخمک گذاری مشهود است. این تغییر همزمان با دورهای رخ میدهد که طی آن استروژن گردش خون در اوج خود است. آبگیری (هیدراتاسیون) بیشتر بافت همبند در مرحله پیش از قاعدگی سبب بزرگی پستان میشود.
نوک پستان ظاهری استوانهای مخروطی دارد. رنگ پاپیلای پستان میتواند صورتی، قهوهای روشن یا قهوهای تیره باشد. این قسمت از طرف خارج توسط اپی تلیوم سنگفرشی مطبّق شاخی پوشیده میشود و در تداوم اپی تلیوم پوست مجاور خود قرار میگیرد. اپی تلیوم پاپیلای پستان بر روی لایهای از بافت همبند سرشار از رشتههای ماهیچهای صاف گسترده شده است. این رشتهها همچون دوایری، پیرامون مجاری شیری عمقی را فرا گرفته و هنگامی که این مجاری به نوک پستان میرسند، رشتههای ماهیچهای به موازات آنها واقع میشوند. پوست اطراف پاپیلا، آرئول را تشکیل میدهد. رنگ آرئول طی حاملگی به علت تجمع موضعی ملانین، از صورتی به قهوهای تیره تبدیل میشود. پس از زایمان، ممکن است آرئول روشنتر شود ولی هیچگاه به رنگ اولیه خود باز نمیگردد. نوک پستان دارای پایانههای عصبی حسی فراوان است.
فرمت:word(قابل ویرایش)
تعداد صفحات:175
چکیده:
دسفری اکسامینB، تنها سیدروفوری است که فرم مزتیله آن (نمک متان سولفونات دسفری اکسامین B) با نام تجاری دسفرال جهت درمان بیماران تالاسمی، به منظور شلاته کردن بار اضافی آهن، استفاده می گردد.
به همین منظور جهت تولید دسفری اکسامین B، از سویه استرپتومایسس پیلوسوس استفاده گردید و سویه مربوطه در محیط کشت Soy bean کشت داده شد و دسفری اکسامین آن بوسیله استفاده از محلول فنل- کلروفرم و اتر استخراج گردید. به منظور طراحی این سیستم بیولوژیکی و افزایش بهره برداری از محصول مذکور از منابع کربن و نیتروژن مختلف استفاده گردید و تاثیر هر یک بر میزان دسفری اکسامین تولیدی بررسی شد. چنانچه مشاهده گردید که اسید آمینه ترئونین، افزایش قابل ملاحظه ای بر دسفری اکسامین تولیدی از سویه مذکور دارد و مقدار %۱۲۵/۰ ترئونین، در محیط کشت Soy bean، بسیار مطلوب می باشد. از طرفی اثر ویتامین تیامین (B1)بررسی گردید و مشاهده شد که تاثیر مثبت بر دسفر اکسامین تولیدی دارد و در رده بعد از اسید آمینه ترئونین قرار می گیرد. همچنین اثر اسید آمینه لوسین نیز بر تولید دسفری اکسامین مثبت بوده و در رده بعد از ویتامین تیامین (B1) قرار می گیرد.
در ایـن تحقـیق از شلاته کننـده های کاتیونی EDTA، ۸-hydroxyquinoline در محـیط کشت Soy bean استفاده شد و مشاهده گردید که شلاته کننده های مذکور اثر منفی بر تولید دسفری اکسامین دارند در نتیجه، کاتیونها، اثر مثبت بر افزایش میزان دسفری اکسامین تولیدی خواهند داشت به همین منظور مواد معدنی مختلف از جمله اثر
CaCl2.2H2O,MgSO4.7H2O,ZnSO4.7H2O, MnCl2, FeSO4.7H2O
و همچنین اثرCaCl2.2H2O,MgSO4.7H2O به طور همزمان در محیط کشت Soy bean بررسی گردید.
در این تحقیق نتایج مطلوبی بدست آمد، بطوری که کلسیم (بصورت CaCl2.2H2O) اثر قابل ملاحظهای بر افزایش میزان دسفری اکسامین تولیدی از سویه مذکور دارد و مقدار ۸/۲، و ۲، CaCl2.2H2O سبب افزایش قابل توجهی بر میزان محصول مذکور می گردد. و بدین ترتیب تاثیر مثبت کلسیم، بر تولید دسفری اکسامین مشخص گردید.
در این آزمایشات تاثیر مثبت روی، منیزیم و منگنز بر دسفری اکسامین تولیدی آشکار گردید بطوری که غلظت ۲-۱۰ × ۴/۰، ZnSO4.7H2O و ۶/۰، MgSO4.7H2O و ۲، MnCl2 سبب افزایش تولید دسفری اکسامین شد.
مقدمه:
چه قدر زیبا و شاعرانه است که انسان به نوای دلنواز عاشقانهای که در دل موجودات زنده نواخته می شود گوش دهد. تمام پدیده های هستی که زائیده اراده و مشیت الهی هستند منظر شناخت خداوند قادرند و چه با شکوه است علمی که انسان طالب معرفت را به سرچشمه شناخت این پدیده ها راهنمایی کند.
چشم دل بازکن که جان بینی آنچه نادیدنی است آن بینی
امروزه عرصه ای از حیات بشری را نمی توان یافت که تأثیر مثبت از بیوتکنولوژی نداشته باشد. کلمه بیوتکنولوژی که از دو بخش بیو (به معنی زندگی و موجودات زنده) و تکنولوژی (به معنای هنر بشر در استفاده از علم) تشکیل شده است بطور کلی بیوتکنولوژی به مفهوم استفاده از موجودات زنده، اندام ها و سلولهای آنها برای تولید یک فرآورده با خدمات با ارزش اقتصادی به منظور بهبودرفاه بشر می باشد. بعبارت دیگر بیوتکنولوژی دانشی است که در رابطه با استفاده از موجودات و متابولیتهای آنها جهت تولید فرآورده های مختلف دارویی، غذایی، شیمیایی و غیره در مقیاس صنعتی بحث می کند.
سرآغاز بیوتکنولوژی به ده هزار سال پیش برمی گردد. روند تکاملی بیوتکنولوژی در طی هزاران سال شکل گرفته است، ولی بیوتکنولوژی مدرن در اواسط دهه 70 متولد شد. از همان آغاز، بیوتکنولوژی در قالب مهندسی شیمی توسعه یافت، از این رو با توسعه ی فرآیندهای صنعتی، گستردگی بیشتری پیدا کرد. بیوتکنولوژی از تکنیکهای مختلف ژنتیک، میکروبیولوژی کاربردی، شیمی، بیو شیمی، بیو لوژی، مهندسی فرآیند و غیره تشکیل میشود.
ابزار توانمند بیوتکنولوژی در پزشکی، کشاورزی، حفاظت از محیط زیست انقلاب عظیمی را بوجود آورد و امیدی برای حل بسیاری از مشکلات حاد بشر در سده بیست و یکم است.
بیوتکنولوژی علمی است که بهترین راه برای یافتن علت بیماری ها و درمان آنها مورد استفاده قرار میگیرد بطوری که در زمینه بهداشت تحولی عظیم ایجاد کرده است.انتقال وبیان ژنهای موجودات زنده و نوترکیبی آنها در آزمایشگاه به تولید محصولاتی که در پیشگیری و تشخیص و درمان بیماری ها کاربرد دارند از مهمترین عرصه های بکارگیری این دانش در توسعه ارتقاء سلامت و بهداشت جامعه و کنترل بیماری های عفونی و غیر عفونی می باشد. تشخیص دقیق و سریعتر بیماریها از جمله ناهنجاریهای ژنتیک و غربالگری از آنها، تشخیص پیش از تولد،استفاده از سلولهای بنیادین و سلولهای پایه و جنینی در مطالعات پایه و کاربردی پزشکی، تولید داروهای نوترکیب، تشخیص هویت، xenotransplantation با استفاده از حیوانات برای تولید بافت و اندام های مورد نیاز انسان، ژن درمانی و درمان بسیاری از بیماریهای صعب العلاج و تولید پروبیوتیک ها، بهبود کیفیت مواد غذایی و از همه مهم تر درک فرآیندهای زیستی عوامل بیماری زا، مکانیزم عمل آنها و تدبیر راهبردهای جدید بهداشت و درمان، تنها تعدادی از کارهای بیوتکنولوژی در عرصه بهداشت و پزشکی است.
و چه زیبا خداوند متعال، این علم را در سوره علق به انسان آموخته است.
بسم الله الرَّحمنِ الرَّحیم
اِقْرَاْ بِاسْمِ رَبِّک الَّذی خَلَقْ [1] خَلَقَ اِلْأنْسانَ مِنْ عَلَقٍ [2] اِقْرَاْ و رَبُّکَ اَلْاَکْرَمُ [3]
اَلَّذی عَلَّمَ بِالْقَلَمِ [4] عَلَّمَ الْأنسانَ مالَمْ یَعْلَمْ [5]
ای رسول گرامی قرآن را به نام پروردگارت که خدای آفریننده عالم است بر خلق قرائت کن آن خدائی که آدمی را از خون بسته بیافرید بخوان قرآن را و پروردگارت کریمترین کریمان عالم است آن خدایی که بشر را علم نوشتن بقلم آموخت و به آدم آنچه را که نمی دانست به الهام خود تعلیم داد
این کلام الهی در کمال ایجاز و اختصار اشاره به تمامی علوم از جمله بیوتکنولوژی دارد، چنانچه در آیه دوم سوره علق، علق (خون بسته) بیانگر سلولهای بنیادی می باشد و خدا در آیه عَلَّمَ الْأِنسانَ مالَمْ یَعْلَمْ ( و به آدم آنچه را که نمی دانست به الهام خود تعلیم داد) بیان داشته است که در کلام قرآن علوم مختلف به انسان الهام و تعلیم داده شده است و همانطور که خداوند بارها تاکید بر تفکر و تعقل در قرآن فرموده است می توان با استعانت از آیات الهی بر بسیاری از علوم فائق آمد.
یقیناً افق روشنتر، در گرو استفاده از ارگانیسمهایی است که بطور ژنتیکی برای تولید فراورده های غیر میکروبی مانند انسولین، اینترفرون، هورمون رشد انسان، واکسنهای ویروسی مهندسی شده اند. چنانچه به تازگی داروی نوترکیب انسانی (Human recombinent) اینترفرون به دست توانای دانشمندان ایرانی ساخته شد و ایران سومین کشور بعد از آمریکا و آلمان در تولید این فرآورده بیوتکنولوژی میباشد.
پس از تولید انسولین انسانی برای درمان دیابت، بیوتکنولوژی همچنان به خلق داروهای جدید و واکسن ها ادامه داده است. این داروها به میلیونها انسانی که در سرتاسر جهان به بیماریهای قلبی، سرطان، دیابت، پارکینسون، آلزایمر، ایدزو…. مبتلا هستند، کمک کرده اند.
طی سالهای 1925 تا 1965 استفاده از میکروبها در صنایع دارویی بصورت یک تحول اساسی، زمینه را برای بکارگرفتن میکروارگانیسم ها در تولید آنتیبیوتیک ها، هورمونها، ویتامینها، داروها و غیره فراهم ساخت. همگام با توسعه آنتی بیوتیک های جدید، تولید اسیدهای آمینه و نوکلئوتیدها نیز با موفقیت به انجام رسید. از زمانی که کشف گردیده بعضی از واکنشهای شیمیایی مشکل در ساخت استروئیدها، می توانند توسط میکروارگانیسم ها با راندمان بالایی انجام شوند، تولید آسان هورمونهای استروئیدی مهم در پزشکی امکان پذیر شد. علاوه بر این تعداد زیادی از فرآیندهای تولید آنزیم برای مصارف صنعتی، تجزیه ای، پزشکی نیز توسعه یافتند. مرحله برجستهتر پیشرفت بیوتکنولوژی، زمانی روی داد که فرایندهای تخمیری مداوم تکمیل شدند. این فرایندها اولین بار به منظور تولید غذای انسان و خوراک دام از باکتریها و مخمرها (پروتئین تک یاخته) استفاده شدند.
شبیه سازی دام، تولید حیوانات ترا ریخته برای بهبود کیفیت و کمیت تولید، تولید آنزیمها، در عرصه محیط زیست، کاهش مصرف سموم شیمیایی، فروشویی معادن با استفاده از ریزساز واره ها، حتی احیای موجودات منقرض شده از جمله دستاوردهای غیر قابل انکار این فناوری هستند. همچنین برای تولید سوختهای بیولوژی و پاکسازی آلودگی ها و پسماندها از آن استفاده می شود. امروزه به لحاظ خطر کمیاب شدن نفت، تولید اتانول سوختی به کمک مواد نشاسته ای شروع شده است، و فرآیندهای میکروبی قدیمی برای ساخت استون و بوتانول از نشاسته ( در دهه 1920 و 1930 توسعه یافته اند) رونق تازه یافته است. برای تولید میکروبی سوخت ها از مواد زائد سلولزی، پتانسیل زیادی وجود دارد اما تا به امروز، این قبیل فرآیندها، هنوز در مرحله آزمایشگاهی خود باقی مانده اند.
داروهایی که از طریق بیوتکنولوژی تهیه می شوند به مراتب کمتر از داروهایی که از طریق شیمیایی سنتز میشوند دارای اثرات زیانبار جانبی هستند همچنین بیوتکنولوژی قادر به ساخت داروهای پیچیده ای است که بطریق دیگر نمیتوان آنها را تولید کرد. بیوتکنولوژی به ویژه با استفاده از روشهای DNA نوترکیب، نقش مهمی در تولید داروها و واکسن ها ایفا کرده است.
داروی دسفرال از جمله داروهایی است که از طریق بیوتکنولوژی تهیه می شود. هم اکنون تولید صنعتی دسفری اکسامین بوسیله تخمیر سویه ای جهش یافته از استرپتومایسس پیلوسوس توسط شرکت نواریتس انجام می شود. بطوری که نمک متان سولفونات دسفری اکسامینB (فرم مزتیله دسفری اکسامین B) با نام تجاری دسفرال جهت درمان بیماران تالاسمی استفاده می گردد.
ما امیدواریم به یاری خداوند متعال و استعانت از کتاب الهی ( قرآن کریم) و سعی و تلاش محققین کشورمان، به پیشرفت های گسترده تری در این زمینه دست یابیم و کشور عزیزمان در کلیه زمینه های علمی و فرهنگی به بالاترین پیشرفتها نایل آید. و با تولید این دارو، بتوان خدمتی به بیماران تالاسمی کشورمان که از این بیماری رنج می برند، نمود.
فهرست مطالب:
عنوان صفحه
چکیده…………………………………………………………………………………………………………………………. ۱
مقدمه………………………………………………………………………………………………………………………….. ۳
فصل اول
۱-۱ – تالاسمی……………………………………………………………………………………………………………… ۸
۱-۲-اتیولوژی و سبب شناسی تالاسمی……………………………………………………………………………….. ۸
۱-۲-۱ – خون شناسی…………………………………………………………………………………………………….. ۹
۱-۲-۲- خون سازی و گلبولهای قرمز……………………………………………………………………………….. ۱۰
۱-۳- تالاسمی و انواع آن………………………………………………………………………………………………. ۱۰
۱-۳-۱ آلفا تالاسمی……………………………………………………………………………………………………… ۱۰
۱-۳-۲- بتا تالاسمی……………………………………………………………………………………………………… ۱۱
۱-۳-۲-۱ بتا تالاسمی مینور(سالم ناقل)……………………………………………………………………………… ۱۱
۱-۳-۲-۲ – بتا تالاسمی ماژور( بیماری تالاسمی)………………………………………………………………… ۱۲
۱-۳-۲-۳-بتا تالاسمی بینابینی…………………………………………………………………………………………. ۱۳
۱-۴- تشخیص تالاسمی………………………………………………………………………………………………… ۱۳
۱-۵- درمان تالاسمی…………………………………………………………………………………………………….. ۱۳
۱-۶- فیزیولوژی عنصر آهن و اهمیت آن در بدن انسان…………………………………………………………. ۱۴
۱-۶-۱- مسمومیت حاد آهنی………………………………………………………………………………………….. ۱۵
۱-۷- دسفرال……………………………………………………………………………………………………………… ۱۶
۱-۷-۱- نحوه استفاده از داروی دسفرال…………………………………………………………………………….. ۱۷
۱-۷-۲-کاربردهای داروی دسفرال در پزشکی…………………………………………………………………….. ۱۸
۱-۷-۳- عوارض ناشی از داروی دسفرال…………………………………………………………………………… ۱۹
۱-۷-۴- اقدامات احتیاطی در مورد داروی دسفرال……………………………………………………………….. ۱۹
۱-۷-۵- ملاک توقف درمان بوسیله دسفرال………………………………………………………………………… ۲۰
فصل دوم
۲-۱- سیدرو فورها……………………………………………………………………………………………………… ۲۲
۲-۱-۱- هیدروکسامات ها……………………………………………………………………………………………… ۲۴
۲-۱-۲-فنولات ها یا کاتکولات ها……………………………………………………………………………………. ۲۵
۲-۲- دسفری اکسامین ها………………………………………………………………………………………………. ۲۶
۲- ۲-۱ – ساختمان دسفری اکسامین………………………………………………………………………………… ۲۸
۲-۲-۲- دسفراکسامین بصورت آنتی اکسیدان……………………………………………………………………… ۲۸
۲-۲-۳ – خصوصیات فیزیکو و شیمیایی دسفراکسامین…………………………………………………………. ۲۹
۲-۲-۴- مکانیسم دسفراکسامین در جلوگیری از بیماریهای با بار اضافی آهن………………………………. ۲۹
۲-۲-۵- تشکیل رادیکال DFO nitroxide…………………………………………………………………….. 30
2-3- دسفری اکسامین B……………………………………………………………………………………………… 31
2-3-1- بیوسنتر دسفری اکسامین B…………………………………………………………………………………. 33
2-3-2- ژنهای کد کننده دسفری اکسامین B………………………………………………………………………. 33
2-4- تولید کنندههای دسفری اکسامین………………………………………………………………………………. ۳۴
۲-۵- اهمیت آهن بر روی میکروارگانیسمها……………………………………………………………………….. ۳۵
۲-۶- مکانیسم عمل سیدروفورها در ارتباط با انتقال آهن به درون سلول میکروارگانیسمها………………. ۳۶
۲-۷- تولید، استخراج و تخلیص دسفری اکسامین B…………………………………………………………….. 37
فصل سوم
۳-۱- اکتینومیست ها…………………………………………………………………………………………………….. ۴۰
۳-۲- استرپتومایسس ها…………………………………………………………………………………………………. ۴۳
۳-۲-۱- پاتولوژی………………………………………………………………………………………………………… ۴۳
۳-۲-۲ – مرفولوژی و ساختمان………………………………………………………………………………………. ۴۳
۳-۲-۳- مشخصات کلنی……………………………………………………………………………………………… ۴۵۴
۳-۲-۴- اسپورزایی……………………………………………………………………………………………………….. ۴۷
۳-۲-۵- ترکیبات پوشش سلولی………………………………………………………………………………………. ۴۹
۳-۲-۶- تغذیه و فاکتورهای موثر بر رشد و خصوصیات فیزیکوشیمیایی…………………………………….. ۴۹
۳-۲-۶-۱- تغذیه…………………………………………………………………………………………………………. ۴۹
۳-۲-۶-۲- اکسیژن……………………………………………………………………………………………………….. ۵۰
3-2-6-3 – رطوبت……………………………………………………………………………………………………… ۵۰
۳-۲-۶-۴- دما…………………………………………………………………………………………………………….. ۵۱
۳-۲-۶-۵- pH…………………………………………………………………………………………………………… 51
3-2-6-6- اکولوژی……………………………………………………………………………………………………… ۵۲
۳-۲-۶-۷- بیولوژی توسعه یافته استرپتومایسس…………………………………………………………………… ۵۳
۳-۲-۷- انواع فرآورده های میکروبی………………………………………………………………………………… ۵۶
۳-۲-۷-۱- متابولیت های اولیه………………………………………………………………………………………… ۵۶
۳-۲-۷-۲- متابولیت های ثانویه……………………………………………………………………………………….. ۵۶
۳-۲-۷-۲-۱- آنتی بیوتیک ها…………………………………………………………………………………………. ۵۸
۳-۲-۷-۲-۱-۱- فیزیولوژی و تنظیم تولید آنتی بیوتیک…………………………………………………………. ۵۸
۳-۲-۷-۳- آنزیمها……………………………………………………………………………………………………….. ۶۳
۳-۲-۷-۳-۱- پروتئازها…………………………………………………………………………………………………. ۶۳
۳-۲-۷-۳-۱-۱- پروتئازهای اسیدی…………………………………………………………………………………. ۶۷
۳-۲-۷-۳-۱-۱-۱- رنین……………………………………………………………………………………………….. ۶۷
۳-۲-۷-۳-۱-۲- پروتئازهای خنثی…………………………………………………………………………………… ۶۷
۳-۲-۷-۳-۱-۳- پروتئاز های قلیایی…………………………………………………………………………………. ۶۷
۳-۲-۷-۳-۱-۳-۱- فرآیند تخمیر پروتئازهای قلیایی…………………………………………………………….. ۶۸
۳-۲-۷-۳-۱-۳-۲- تعیین فعالیت پروتئاز قلیایی………………………………………………………………….. ۶۹
۳-۲-۷-۳-۱-۴- بازدارنده های فعالیت آنزیم پروتئاز وشلاته کننده ها……………………………………….. ۶۹
۳-۲-۷-۳-۱-۵- تجزیه…………………………………………………………………………………………………. ۷۱
۳-۲-۷-۳-۱-۶- پروتئاز ها و استرپتومایسسها…………………………………………………………………….. ۷۱
۳-۲-۸- محیط کشت تخمیر صنعتی………………………………………………………………………………… ۷۱
۳-۲-۸-۱- نیازهای غذایی میکروارگانیسمها……………………………………………………………………….. ۷۱
۳-۲-۸-۱-۱- کربن………………………………………………………………………………………………………. ۷۴
۳-۲-۸-۱-۱-۱- منابع کربن و استرپتومایسس ها…………………………………………………………………. ۷۷
۳-۲-۸-۱-۲-نیتروژن……………………………………………………………………………………………………. ۷۸
۳-۲-۸-۱-۲-۱- منابع نیتروژن و استرپتومایسس ها…………………………………………………………….. ۸۰
۳-۲-۸-۱-۳- هیدروژن و اکسیژن……………………………………………………………………………………. ۸۰
3-2-8-1-4- مواد معدنی………………………………………………………………………………………………. ۸۰
۳-۲-۸-۲-تنظیم کننده های متابولیکی………………………………………………………………………………… ۸۱
۳-۲-۸-۳- ضد کف ها…………………………………………………………………………………………………. ۸۲
۳-۲-۹- بیوسنتز در استرپتومایسس ها………………………………………………………………………………. ۸۳
فصل چهارم
۴-۱- دستگاه های مورد استفاده……………………………………………………………………………………….. ۸۶
۴-۲- وسایل مورد استفاده………………………………………………………………………………………………. ۸۶
۴-۳ – محیط های کشت مایع برای رشد باکتری………………………………………………………………….. ۸۸
۴-۴- محیط های کشت جامد برای رشد باکتری………………………………………………………………….. ۸۹
۴-۵- محیط های جامد برای تولید اسپور……………………………………………………………………………. ۸۹
۴-۶- مواد لازم جهت رنگ آمیزی گرم……………………………………………………………………………… ۹۰
۴-۷- مواد لازم جهت استفاده از میکروسکوپ نوری…………………………………………………………….. ۹۱
۴-۸- محیط مورد استفاده جهت شناسایی کیفی دسفری اکسامین: محیط Des4……………………………. 91
4-9- محیط مورد استفاده جهت اندازه گیری تولید دسفری اکسامین محیط Soy bean ………………. 91
4-10- مواد لازم جهت نگهداری و ذخیره باکتری ها…………………………………………………………….. ۹۲
۴-۱۱- معرف های دسفری اکسامین…………………………………………………………………………………. ۹۲
۴-۱۲- مواد لازم جهت رسم منحنی استاندارد دسفری اکسامین B……………………………………………. 92
4-13- مواد لازم جهت استخراج دسفری اکسامین………………………………………………………………… ۹۲
۴-۱۴- مواد لازم جهت تهیه محلول Lysing Buffer…………………………………………………………. 93
4-14-1 – مواد لازم جهت تهیه محلول Tris Hcl……………………………………………………………… 93
4-15- محلول کازئین %۵/۰ دربافر فسفات…………………………………………………………………………. ۹۳
۴-۱۵-۱- بافر فسفات (PBS)……………………………………………………………………………………….. 93
4-16- محلول لوری (Lowry)……………………………………………………………………………………… 93
فصل پنجم
۵ – ١- تهیه و آماده سازی سویه استرپتومایسس پیلوسوس…………………………………………………….. ۹۸
۵ ـ ٢ ـ بررسی خصوصیات مرفولوژیکی سویه استرپتومایسس پیلوسوس……………………………………. ۹۸
۵-٢-١- خصوصیات ماکروسکوپی…………………………………………………………………………………… ۹۹
۵- ٢-١-١- کشت استرپتومایسس پیلوسوس بر روی محیط جامد……………………………………………. ۹۹
5-٢-١-٢- کشت استرپتومایسس پیلوسوس در محیط مایع…………………………………………………….. ۹۹
۵-٢-٢ خصوصیات میکروسکوپی…………………………………………………………………………………….. ۹۹
۵-٢-٢-١- تهیه لام از محیط کشت جامد…………………………………………………………………………… ۹۹
۵-٢-٢-٢- تهیه لام از محیط کشت مایع………………………………………………………………………….. ۱۰۰
۵ـ ٢ـ٢ـ ٣ـ رنگ آمیزی گرم…………………………………………………………………………………………. ۱۰۰
۵ ـ ٣ـ تهیه مایع تلقیح…………………………………………………………………………………………………. ۱۰۰
۵ ـ ٣ـ ١ـ تهیه محیط ذخیره………………………………………………………………………………………….. ۱۰۱
۵ ـ ٣ـ ٢ـ تهیه سوسپانسیون اسپور………………………………………………………………………………….. ۱۰۱
۵ـ ۴ـ رسم منحنی رشد استرپتومایسس پیلوسوس……………………………………………………………….. ۱۰۱
۵ـ ۵ـ بررسی تغییرات pH در محیط کشت Soybean…………………………………………………….. 102
5ـ ۶ـ تولید دسفری اکسامین توسط استرپتومایسس پیلوسوس……………………………………………….. ۱۰۲
۵ـ ۶ـ ١ـ تشخیص کیفی دسفری اکسامین………………………………………………………………………… ۱۰۲
۵ـ ۶ـ ٢ـ سنجش میزان تولید دسفری اکسامین در هر روز…………………………………………………….. ۱۰۳
۵-۶-۳- رسم منحنی استاندارد دسفرال…………………………………………………………………………….. ۱۰۳
۵-٧ـ استخراج دسفری اکسامین بوسیله فنل-کلروفرم………………………………………………………….. ۱۰۴
۵ ـ ٧ـ ١ـ مزتیله کردن دسفری اکسامین………………………………………………………………………….. ۱۰۵
۵-۸- تعیین وجود دسفری اکسامین B در ماده استخراج شده………………………………………………… ۱۰۵
۵ـ ٩ـ بهینه سازی محیط کشت تولید دسفری اکسامین………………………………………………………… ۱۰۷
۵ـ ٩ـ ١ـ بررسی اثر اسید آمینه ترئونین بر تولید دسفری اکسامین……………………………………………. ۱۰۷
۵ ـ ٩ـ ١ـ ١ـ بررسی اثر اسید آمینه ترئونین بر تولید دسفری اکسامین در یک محدوده غلظت………… ۱۰۷
۵ـ ٩ـ ٢ـ بررسی اثر اسیدآمینه ترئونین و اسید آمینه لوسین و ویتامین تیامینB1) ( برتولید دسفری اکسامین ۱۰۸
۵ ـ ٩ـ ٣ـ بررسی گلوکز و ملاس و سوکروز بر تولید دسفری اکسامین……………………………………. ۱۰۸
۵ـ ٩ـ ۴ـ بررسی اثر شلاته کننده های کاتیون بر تولید دسفری اکسامین…………………………………….. ۱۰۸
۵ ـ ٩ـ ۵ـ استفاده از محیط کشت عصاره مخمر به جای استفاده از محیط کشت Soybean……….. 109
5 ـ ٩ـ ۶ـ بررسی اثر مواد معدنی مختلف بر میزان تولید دسفری اکسامین…………………………………. ۱۰۹
۵ ـ٩ـ۶ـ١ـ بررسی تاثیر مواد معدنی در غلظت های مختلف بر میزان تولید دسفری اکسامین………….. ۱۱۱
5 ـ ١٠ – بررسی پروتئاز تولیدی از استرپتومایسس پیلوسوس در حضور شلاته کننده ها و مواد معدنی مختلف ۱۱۲
۵ ـ ١٠ـ ١ـ کشت باکتری و سنجش پروتئاز……………………………………………………………………… ۱۱۲
۵ ـ ١٠ـ ۲ـ تخلیص کازئین…………………………………………………………………………………………… ۱۱۳
فصل ششم
۶ـ ١ـ بررسی خصوصیات مرفولوژیکی ماکروسکوپی استرپتومایسس پیلوسوس………………………….. ۱۱۵
۶ـ ١ـ ١ـ خصوصیات ماکروسکوپی سویه استاندارد بر روی محیط کشت جامد………………………….. ۱۱۵
۶ ـ ١ـ٢ـ خصوصیات ماکروسکوپی سویه استاندارد در محیط کشت مایع…………………………………. ۱۱۵
۶ ـ ٢ـ بررسی خصوصیات مرفولوژیکی میکروسکوپی استرپتومایسس پیلوسوس………………………… ۱۱۶
۶ ـ٣ـ رسم منحنی رشد استرپتوماسیس پیلوسوس در محیط کشت MYB……………………………….. 116
6-4- رسم منحنی pH بر حسب زمان در محیط کشت Soybean حاوی سویه استرپتومایسس پیلوسس…. ۱۱۸
۶ ـ ۵ـ تشخیص کیفی و کمی دسفری اکسامین تولیدی………………………………………………………… ۱۲۰
۶-۵-۱- تشخیص کیفی و تولید و یا عدم تولید دسفری اکسامین……………………………………………. ۱۲۰
۶ـ۵ـ۲ـ رسم نمودار استاندارد دسفرال……………………………………………………………………………… ۱۲۰
۶ـ۵ـ۳ـ میزان دسفری اکسامین تولیدی در هر روز توسط سویه استرپتومایسس پیلوسوس در محیط Soy bean……………………………………………………………………………………………………………………………… 121
6-6- نتایج مربوط به استخراج دسفری اکسامین تولید شده توسط سویه استرپتومایسس پیلوسوس…… ۱۲۲
۶-۶-۱- نتایج مربوط به تأیید وجود دسفری اکسامین B در ماده استخراج شده………………………….. ۱۲۲
۶-۷- بهینه سازی محیط کشت تولید دسفری اکسامین………………………………………………………… ۱۲۴
۶-۷-۱ بررسی اثر اسید آمینه ترئونین بر تولید دسفری اکسامین……………………………………………… ۱۲۴
۶-۷-۱-۱- بررسی اثر اسید آمینه ترئونین بر تولید دسفری اکسامین در یک محدوده غلظت…………… ۱۲۴
۶ـ۷ـ ٢ـ بررسی اثر اسید آمینه های ترئونین و لوسین و ویتامین تیامین (B1 )…………………………….. 126
6 ـ ۷ـ٣ـ بررسی گلوکز ، ملاس، سوکروز بر تولید دسفری اکسامین………………………………………… ۱۲۶
۶ـ ۷ـ ۴ـ بررسی اثر شلاته کننده های کاتیون بر میزان تولید دسفری اکسامین…………………………….. ۱۲۷
۶ـ ۷ـ ۵ـ استفاده از محیط کشت عصاره مخمر به جای استفاده از محیط کشت Soybean………….. 128
6 ـ ۷ـ ۶ـ بررسی اثر مواد معدنی مختلف بر میزان تولید دسفری اکسامین…………………………………. ۱۲۸
۶ – ۷ – ۶ – ۱ – بررسی اثر مواد مختلف با غلظت متفاوت بر میزان تولید دسفری اکسامین ……….. ۱۳۰
6ـ۸ـ بررسی پروتئاز تولیدی از استرپتومایسس پیلوسوس در حضور شلاتهکننده و مواد معدنی مختلف ۱۳۹
فصل هفتم
– بحث و نتیجه گیری………………………………………………………………………………………………….. ۱۴۳
– پیشنهادات…………………………………………………………………………………………………
فرمت:word ,قابل ویرایش
چکیده پایان نامه
اطلاع از مسیرهای متابولیسم دارو نقش مهمی در درک سمیت دارو دارد. این اطلاعات می توانند در طراحی داروهای جدید و روشن کردن مکانیسم سرطان زایی ترکیبات شیمیایی به کار روند. از
این رو یافتن روشی مناسب برای بررسی متابولیسم داروها گام مهمی در جهت رسیدن به دیگر اطلاعات با ارزش در مورد داروها است. متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان، خرگوش و موش صحرایی بررسی شده است. طبق نتایج به دست آمده از این مطالعات نوسکاپین از دو مسیر o- دمتیلاسیون و شکسته شدن پیوند C1-9 متابولیزه می شود و مکونین به عنوان محصول عمده متابولیسم آن شناخته شده است. در این تحقیق متابولیسم نوسکاپین توسط یک روش ex vivo، سلولهای جدا شده کبدی، مورد بررسی قرار گرفت این روش از چند جنبه دارای اهمیت است: این روش حد واسط مناسبی بین روشهای قبلی مانند آنزیم های حل شده، فراکسیون ارگان جدا شده و مطالعه مستقیم روی حیوان کامل است. این سلولها خصوصیات لازم بافت دست نخورده مانند نفوذپذیری غشا را دارا هستند از این رو در بسیاری از مطالعات بیوشیمیایی به کار می روند.
در این تحقیق سلولهای کبد موش صحرایی طی یک فرآیند دقیق جدا شدند و زنده بودن آنها با آزمایش منع تریپان آبی %1/0 و مشاهده میکروسکوپی سلولها تأیید شد. شناسایی استاندارد داروی نوسکاپین و متابولیت اصلی آن، مکونین توسط روش HPLC صورت گرفت. اگر چه استانداردهای نوسکاپین و متابولیت اصلی آن در محلولهای Spike شده مشاهده شدند اما این روش قادر به شناسایی متابولیت ها در عصاره سلولی نبود. به نظر می رسد که افزایش حساسیت روش به مشاهده همزمان نوسکاپین و متابولیت ها کمک کند.
فهرست مطالب موجود این پایان نامه به شرح زیر است:
چکیده پایان نامه
بخش اول: مقدمه
مقدمه......................................................................................................................
1-1- اوپیوییدها.......................................................................................................
1-1-1- تاریخچه.....................................................................................................
1-1-2- آلکالوییدهای تریاک.....................................................................................
1-1-3- پپتیدهای اوپیویید درون زاد..........................................................................
1-1-4- آثار اوپیوییدها بر اعضای مختلف..................................................................
1-1-5- مصارف بالینی اوپیوییدها..............................................................................
1-2- متابولیسم........................................................................................................
1-2-1- تاریخچه.....................................................................................................
1-2-2- کلیات متابولیسم..........................................................................................
1-2-3- مکان های متابولیسم داروها..........................................................................
1-2-4- عوامل تعیین کننده سرعت تغییر شکل زیستی.................................................
1-2-5- تکنیک های تجربی بررسی متابولیسم............................................................
1-2-6- کاربرد و اهمیت بررسی متابولیسم.................................................................
1-3- جداسازی سلولهای کبد....................................................................................
1-4- روش های مطالعه شده برای شناسایی و اندازه گیری نوسکاپین و متابولیت هایش..
1-5- کلیاتی درباره کروماتوگرافی و HPLC..............................................................
1-5-1- تاریخچه.....................................................................................................
1-5-2- اساس کروماتوگرافی....................................................................................
1-5-3- فازهای متحرک و ساکن در کروماتوگرافی مایع..............................................
1-5-4- کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا..................................................................
1-5-5- اساس دستگاه HPLC..................................................................................
1-6- نوسکاپین........................................................................................................
1-6-1- برخی اثرات نوسکاپین.................................................................................
1-6-2- فارماکوکینتیک نوسکاپین..............................................................................
1-6-3- مروری بر روند متابولیسم نوسکاپین..............................................................
بخش دوم: روشها و مواد
2-1- اهداف مطالعه..................................................................................................
2-2- دستگاه ها و وسایل ........................................................................................
2-3- مواد...............................................................................................................
2-4- تهیه بافرهای پرفیوژن.......................................................................................
2-4-1- محلول Stock بافر هنکس با غلظت 10 برابر..................................................
2-4-2- محلول Stock بافر کربس- هنزلیت با غلظت 2 برابر.......................................
2-4-3- بافر هنکس یک...........................................................................................
2-4-4- بافر هنکس دو............................................................................................
2-4-5- بافر کربس آلبومین......................................................................................
2-4-6- بافر کربس- هپس.......................................................................................
2-5- تهیه محلول کلاژن و کوت کردن پلیت 6خانه.....................................................
2-6- محیط کشت...................................................................................................
2-6-1- مراحل تهیه محیط کشت: (1:1) DMEM, F12.................................................
2-7- سرم جنین گاو (FBS).....................................................................................
2-8- کیت استریل پرفیوژن.......................................................................................
2-9- تهیه هپاتوسیت های تازه..................................................................................
2-9-1- نگهداری سلولهای به دست آمده از کبد موش................................................
2-9-2- بررسی حیات سلولی و نحوه اثر دادن دارو روی سلولهای جدا شده از کبد موش............
2-9-3- تهیه نمونه برای انجام آنالیز...........................................................................
2-10- روش سنتز مکونین (6 و 7- دی متوکسی فتالید)..............................................
2-11- دلایل انتخاب HPLC....................................................................................
2-11-1- مشخصات دستگاه HPLC.........................................................................
2-11-2- انواع روش های HPLC آزمایش شده.........................................................
2-11-3- روش تهیه بافر 10X استات با 4 pH=........................................................
2-11-4- روش تهیه بافر فسفات سدیم Mm 25 با 5/4 pH=......................................
2-12- استخراج متابولیت از ادرار انسان.....................................................................
بخش سوم: نتایج
3-1- جداسازی سلولهای کبد....................................................................................
3-2- سنتز مکونین...................................................................................................
3-3- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)....................................................
بخش چهارم: بحث و نتیجه گیری
4-1- جداسازی سلول های کبد موش........................................................................
4-2- روش کروماتوگرافی با کارکرد عالی (HPLC)....................................................
4-3- متابولیسم نوسکاپین.........................................................................................
4-4- متابولیسم نوسکاپین در ادرار انسان....................................................................
خلاصه انگلیسی.......................................................................................................
منابع........................................................................................................................
اختصارات...............................................................................................................